Dalam proyek sebelumnya yang menguji pabrik pengolahan makanan lokal untuk nyamuk di Thailand, minyak atsiri (EO) dari Cyperus rotundus, lengkuas dan kayu manis ditemukan memiliki aktivitas anti nyamuk yang baik terhadap Aedes aegypti.Sebagai upaya untuk mengurangi penggunaan tradisionalinsektisidadan meningkatkan pengendalian populasi nyamuk yang resisten, penelitian ini bertujuan untuk mengidentifikasi potensi sinergis antara efek pembasmian etilen oksida dan toksisitas permetrin terhadap nyamuk Aedes.aegypti, termasuk strain yang resisten terhadap piretroid dan sensitif.
Untuk mengevaluasi komposisi kimia dan aktivitas membunuh EO yang diekstraksi dari rimpang C. rotundus dan A. galanga serta kulit kayu C. verum terhadap strain rentan Muang Chiang Mai (MCM-S) dan strain resisten Pang Mai Dang (PMD-R ).) Ae. aktif dewasa.Aedes aegypti.Bioassay dewasa terhadap campuran EO-permetrin juga dilakukan pada nyamuk Aedes ini untuk memahami aktivitas sinergisnya.strain aegypti.
Karakterisasi kimia menggunakan metode analisis GC-MS menunjukkan bahwa 48 senyawa teridentifikasi dari EO C. rotundus, A. galanga dan C. verum, masing-masing menyumbang 80,22%, 86,75% dan 97,24% dari total komponen.Cyperene (14,04%), β-bisabolene (18,27%), dan cinnamaldehyde (64,66%) masing-masing merupakan komponen utama minyak cyperus, minyak lengkuas, dan minyak balsamic.Dalam uji pembunuhan biologis orang dewasa, C. rotundus, A. galanga dan C. verum EVs efektif dalam membunuh Ae.aegypti, MCM-S dan PMD-R LD50 masing-masing sebesar 10,05 dan 9,57 μg/mg betina, 7,97 dan 7,94 μg/mg betina, serta 3,30 dan 3,22 μg/mg betina.Efisiensi MCM-S dan PMD-R Ae dalam membunuh nyamuk dewasa.aegypti dalam EO ini mendekati piperonil butoksida (nilai PBO, LD50 = 6,30 dan 4,79 μg/mg betina, masing-masing), tetapi tidak sekuat permetrin (nilai LD50 = 0,44 dan 3,70 ng/mg betina masing-masing).Namun, bioassay kombinasi menemukan sinergi antara EO dan permetrin.Sinergi yang signifikan dengan permetrin terhadap dua strain nyamuk Aedes.Aedes aegypti tercatat dalam EM C. rotundus dan A. galanga.Penambahan minyak C. rotundus dan A. galanga secara nyata menurunkan nilai LD50 permetrin pada MCM-S masing-masing dari 0,44 menjadi 0,07 ng/mg dan 0,11 ng/mg pada betina dengan nilai synergy ratio (SR) masing-masing sebesar 6,28 dan 4,00.Selain itu, EO C. rotundus dan A. galanga juga secara signifikan menurunkan nilai LD50 permetrin pada PMD-R masing-masing dari 3,70 menjadi 0,42 ng/mg dan 0,003 ng/mg pada wanita, dengan nilai SR 8,81 dan 1233,33, masing-masing..
Efek sinergis dari kombinasi EO-permetrin untuk meningkatkan toksisitas orang dewasa terhadap dua strain nyamuk Aedes.Aedes aegypti menunjukkan peran yang menjanjikan dari etilen oksida sebagai sinergis dalam meningkatkan kemanjuran anti-nyamuk, terutama ketika senyawa tradisional tidak efektif atau tidak tepat.
Nyamuk Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) merupakan vektor utama demam berdarah dan penyakit virus menular lainnya seperti demam kuning, chikungunya dan virus Zika, yang merupakan ancaman besar dan terus-menerus bagi manusia[1, 2]..Virus dengue adalah demam berdarah patogen paling serius yang menyerang manusia, dengan perkiraan 5-100 juta kasus terjadi setiap tahunnya dan lebih dari 2,5 miliar orang di seluruh dunia berisiko [3].Wabah penyakit menular ini memberikan beban besar pada populasi, sistem kesehatan, dan perekonomian di sebagian besar negara tropis [1].Menurut Kementerian Kesehatan Thailand, terdapat 142.925 kasus demam berdarah dan 141 kematian yang dilaporkan secara nasional pada tahun 2015, lebih dari tiga kali lipat jumlah kasus dan kematian pada tahun 2014 [4].Meskipun terdapat bukti sejarah, demam berdarah telah diberantas atau dikurangi secara signifikan melalui nyamuk Aedes.Setelah pengendalian Aedes aegypti [5], tingkat infeksi meningkat secara dramatis dan penyakit ini menyebar ke seluruh dunia, yang sebagian disebabkan oleh pemanasan global selama beberapa dekade.Eliminasi dan pengendalian Ae.Aedes aegypti tergolong sulit karena merupakan vektor nyamuk domestik yang kawin, mencari makan, beristirahat dan bertelur di dalam dan sekitar tempat tinggal manusia pada siang hari.Selain itu, nyamuk ini mempunyai kemampuan beradaptasi terhadap perubahan atau gangguan lingkungan yang disebabkan oleh peristiwa alam (seperti kekeringan) atau tindakan pengendalian yang dilakukan manusia, dan dapat kembali ke jumlah semula [6, 7].Karena vaksin untuk melawan demam berdarah baru saja disetujui dan belum ada pengobatan khusus untuk demam berdarah, pencegahan dan pengurangan risiko penularan demam berdarah bergantung sepenuhnya pada pengendalian vektor nyamuk dan menghilangkan kontak manusia dengan vektor tersebut.
Secara khusus, penggunaan bahan kimia untuk pengendalian nyamuk kini memainkan peran penting dalam kesehatan masyarakat sebagai komponen penting dari pengelolaan vektor terpadu yang komprehensif.Metode kimia yang paling populer termasuk penggunaan insektisida dengan toksisitas rendah yang bekerja melawan jentik nyamuk (larvisida) dan nyamuk dewasa (adidokida).Pengendalian larva melalui pengurangan sumber dan penggunaan larvasida kimia secara teratur seperti organofosfat dan zat pengatur tumbuh serangga dianggap penting.Namun, dampak buruk terhadap lingkungan yang terkait dengan pestisida sintetis dan pemeliharaannya yang padat karya dan rumit masih menjadi perhatian utama [8, 9].Pengendalian vektor aktif secara tradisional, seperti pengendalian orang dewasa, tetap menjadi cara pengendalian yang paling efektif selama wabah virus karena dapat memberantas vektor penyakit menular dengan cepat dan dalam skala besar, serta mengurangi umur dan umur panjang populasi vektor lokal [3]., 10].Empat kelas insektisida kimia: organoklorin (disebut hanya sebagai DDT), organofosfat, karbamat, dan piretroid menjadi dasar program pengendalian vektor, dengan piretroid dianggap sebagai kelas yang paling sukses.Mereka sangat efektif melawan berbagai arthropoda dan memiliki efektivitas yang rendah.toksisitas terhadap mamalia.Saat ini, piretroid sintetik merupakan mayoritas pestisida komersial, menguasai sekitar 25% pasar pestisida global [11, 12].Permetrin dan deltametrin adalah insektisida piretroid spektrum luas yang telah digunakan di seluruh dunia selama beberapa dekade untuk mengendalikan berbagai hama yang penting bagi pertanian dan medis [13, 14].Pada tahun 1950an, DDT terpilih sebagai bahan kimia pilihan untuk program pengendalian nyamuk kesehatan masyarakat nasional Thailand.Menyusul meluasnya penggunaan DDT di daerah endemik malaria, Thailand secara bertahap menghentikan penggunaan DDT antara tahun 1995 dan 2000 dan menggantinya dengan dua jenis piretroid: permetrin dan deltametrin [15, 16].Insektisida piretroid ini diperkenalkan pada awal tahun 1990an untuk mengendalikan malaria dan demam berdarah, terutama melalui perawatan kelambu dan penggunaan kabut termal serta semprotan dengan toksisitas sangat rendah [14, 17].Namun, obat-obatan tersebut telah kehilangan efektivitasnya karena kuatnya resistensi nyamuk dan kurangnya kepatuhan masyarakat karena kekhawatiran terhadap kesehatan masyarakat dan dampak lingkungan dari bahan kimia sintetis.Hal ini menimbulkan tantangan yang signifikan terhadap keberhasilan program pengendalian vektor ancaman [14, 18, 19].Agar strategi ini lebih efektif, diperlukan tindakan penanggulangan yang tepat waktu dan tepat.Prosedur pengelolaan yang direkomendasikan meliputi substitusi bahan alami, rotasi bahan kimia dari kelas yang berbeda, penambahan sinergis, dan pencampuran bahan kimia atau penerapan bahan kimia dari kelas yang berbeda secara bersamaan [14, 20, 21].Oleh karena itu, terdapat kebutuhan mendesak untuk menemukan dan mengembangkan alternatif dan sinergis yang ramah lingkungan, nyaman dan efektif dan penelitian ini bertujuan untuk menjawab kebutuhan tersebut.
Insektisida yang berasal dari alam, terutama yang berbahan dasar tanaman, telah menunjukkan potensi dalam evaluasi alternatif pengendalian nyamuk saat ini dan masa depan [22, 23, 24].Beberapa penelitian menunjukkan bahwa pengendalian vektor nyamuk penting dapat dilakukan dengan menggunakan produk tanaman, terutama minyak atsiri (EO), sebagai pembunuh nyamuk dewasa.Sifat pembasmi hama terhadap beberapa spesies nyamuk penting telah ditemukan di banyak minyak nabati seperti seledri, jinten, zedoaria, adas manis, lada pipa, thyme, Schinus terebinthifolia, Cymbopogon citratus, Cymbopogon schoenanthus, Cymbopogon giganteus, Chenopodium ambrosioides, Cochlospermum planchonii, Eucalyptus ter eticornis ., Eucalyptus citriodora, Cananga odorata dan Petroselinum Criscum [25,26,27,28,29,30].Etilen oksida kini tidak hanya digunakan sendiri, namun juga dikombinasikan dengan bahan tanaman yang diekstrak atau pestisida sintetik yang sudah ada, sehingga menghasilkan berbagai tingkat toksisitas.Kombinasi insektisida tradisional seperti organofosfat, karbamat dan piretroid dengan etilen oksida/ekstrak tumbuhan bertindak secara sinergis atau antagonis dalam efek toksiknya dan telah terbukti efektif melawan vektor penyakit dan hama [31,32,33,34,35].Namun, sebagian besar penelitian mengenai efek toksik sinergis dari kombinasi fitokimia dengan atau tanpa bahan kimia sintetik telah dilakukan pada serangga vektor dan hama pertanian dibandingkan pada nyamuk yang penting secara medis.Selain itu, sebagian besar penelitian mengenai efek sinergis kombinasi insektisida sintetik tanaman terhadap vektor nyamuk berfokus pada efek larvasida.
Dalam penelitian sebelumnya yang dilakukan oleh penulis sebagai bagian dari proyek penelitian yang sedang berlangsung untuk menyaring intimisida dari tanaman pangan asli di Thailand, etilen oksida dari Cyperus rotundus, lengkuas, dan kayu manis ditemukan memiliki aktivitas potensial terhadap nyamuk Aedes dewasa.Mesir [36].Oleh karena itu, penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi efektivitas EO yang diisolasi dari tanaman obat tersebut terhadap nyamuk Aedes.aegypti, termasuk strain yang resisten terhadap piretroid dan sensitif.Efek sinergis campuran biner etilen oksida dan piretroid sintetik dengan khasiat yang baik pada orang dewasa juga telah dianalisis untuk mengurangi penggunaan insektisida tradisional dan meningkatkan resistensi terhadap vektor nyamuk, terutama terhadap Aedes.Aedes aegypti.Artikel ini melaporkan karakterisasi kimia minyak atsiri yang efektif dan potensinya untuk meningkatkan toksisitas permetrin sintetis terhadap nyamuk Aedes.aegypti pada strain sensitif piretroid (MCM-S) dan strain resisten (PMD-R).
Rimpang C. rotundus dan A. galanga serta kulit kayu C. verum (Gambar 1) yang digunakan untuk ekstraksi minyak atsiri dibeli dari pemasok obat herbal di Provinsi Chiang Mai, Thailand.Identifikasi ilmiah tanaman ini dicapai melalui konsultasi dengan Bapak James Franklin Maxwell, Ahli Botani Herbarium, Departemen Biologi, Sekolah Tinggi Sains, Universitas Chiang Mai (CMU), Provinsi Chiang Mai, Thailand, dan ilmuwan Wannari Charoensap;di Departemen Farmasi, Sekolah Tinggi Farmasi, Universitas Carnegie Mellon, spesimen Ms. Voucher dari setiap tanaman disimpan di Departemen Parasitologi di Fakultas Kedokteran Universitas Carnegie Mellon untuk digunakan di masa mendatang.
Sampel tanaman dikeringkan secara individual selama 3-5 hari di ruang terbuka dengan ventilasi aktif dan suhu sekitar 30 ± 5 °C untuk menghilangkan kadar air sebelum ekstraksi minyak atsiri alami (EO).Sebanyak 250 g setiap bahan tanaman kering digiling secara mekanis menjadi bubuk kasar dan digunakan untuk mengisolasi minyak atsiri (EO) dengan distilasi uap.Peralatan distilasi terdiri dari mantel pemanas listrik, labu alas bulat 3000 mL, kolom ekstraksi, kondensor, dan alat Cool ace (Eyela Cool Ace CA-1112 CE, Tokyo Rikakikai Co. Ltd., Tokyo, Jepang) .Tambahkan 1600 ml air sulingan dan 10-15 manik-manik kaca ke dalam labu kemudian panaskan hingga suhu kurang lebih 100°C menggunakan pemanas listrik selama minimal 3 jam hingga distilasi selesai dan tidak ada lagi EO yang dihasilkan.Lapisan EO dipisahkan dari fase air menggunakan corong pemisah, dikeringkan dengan natrium sulfat anhidrat (Na2SO4) dan disimpan dalam botol coklat tertutup pada suhu 4°C sampai komposisi kimia dan aktivitas dewasa diperiksa.
Komposisi kimia minyak atsiri dilakukan bersamaan dengan bioassay zat dewasa.Analisis kualitatif dilakukan dengan menggunakan sistem GC-MS yang terdiri dari kromatografi gas Hewlett-Packard (Wilmington, CA, USA) 7890A yang dilengkapi dengan detektor selektif massa quadrupole tunggal (Agilent Technologies, Wilmington, CA, USA) dan MSD 5975C (EI ).(Teknologi Agilent).
Kolom kromatografi – DB-5MS (30 m × ID 0,25 mm × ketebalan film 0,25 µm).Total waktu pengoperasian GC-MS adalah 20 menit.Kondisi analisisnya adalah suhu injektor dan jalur transfer masing-masing adalah 250 dan 280 °C;suhu tungku diatur meningkat dari 50°C menjadi 250°C dengan laju 10°C/menit, gas pembawanya adalah helium;laju aliran 1,0 ml/menit;volume injeksi adalah 0,2 µL (1/10% volume dalam CH2Cl2, rasio pemisahan 100:1);Sistem ionisasi elektron dengan energi ionisasi 70 eV digunakan untuk deteksi GC-MS.Kisaran perolehannya adalah 50–550 unit massa atom (sma) dan kecepatan pemindaiannya adalah 2,91 pemindaian per detik.Persentase relatif komponen dinyatakan sebagai persentase yang dinormalisasi berdasarkan luas puncak.Identifikasi bahan EO didasarkan pada indeks retensinya (RI).RI dihitung menggunakan persamaan Van den Dool dan Kratz [37] untuk deret n-alkana (C8-C40) dan dibandingkan dengan indeks retensi dari literatur [38] dan database perpustakaan (NIST 2008 dan Wiley 8NO8).Identitas senyawa yang ditampilkan, seperti struktur dan rumus molekul, dikonfirmasi melalui perbandingan dengan sampel asli yang tersedia.
Standar analitik untuk permetrin sintetik dan piperonil butoksida (PBO, kontrol positif dalam studi sinergi) dibeli dari Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA).Peralatan pengujian dewasa Organisasi Kesehatan Dunia (WHO) dan dosis diagnostik kertas yang diresapi permetrin (0,75%) dibeli secara komersial dari Pusat Pengendalian Vektor WHO di Penang, Malaysia.Semua bahan kimia dan reagen lain yang digunakan memiliki kualitas analitis dan dibeli dari institusi lokal di Provinsi Chiang Mai, Thailand.
Nyamuk yang digunakan sebagai organisme uji dalam bioassay dewasa adalah nyamuk Aedes yang dikawinkan secara bebas di laboratorium.aegypti, termasuk strain Muang Chiang Mai (MCM-S) yang rentan dan strain Pang Mai Dang yang resisten (PMD-R).Strain MCM-S diperoleh dari sampel lokal yang dikumpulkan di daerah Muang Chiang Mai, Provinsi Chiang Mai, Thailand, dan telah disimpan di ruang entomologi Departemen Parasitologi, Fakultas Kedokteran CMU, sejak tahun 1995 [39].Strain PMD-R, yang ditemukan resisten terhadap permetrin, diisolasi dari nyamuk lapangan yang awalnya dikumpulkan dari Ban Pang Mai Dang, Distrik Mae Tang, Provinsi Chiang Mai, Thailand, dan telah dipelihara di lembaga yang sama sejak tahun 1997 [40 ].Strain PMD-R ditumbuhkan di bawah tekanan selektif untuk mempertahankan tingkat resistensi dengan paparan intermiten terhadap permetrin 0,75% menggunakan alat deteksi WHO dengan beberapa modifikasi [41].Setiap strain Ae.Aedes aegypti dikolonisasi secara individual di laboratorium bebas patogen pada suhu 25 ± 2 °C dan kelembaban relatif 80 ± 10% dan fotoperiode terang/gelap 14:10 jam.Sekitar 200 larva disimpan dalam nampan plastik (panjang 33 cm, lebar 28 cm dan tinggi 9 cm) yang diisi dengan air keran dengan kepadatan 150–200 larva per nampan dan diberi makan dua kali sehari dengan biskuit anjing yang disterilkan.Cacing dewasa dipelihara dalam kandang yang lembab dan terus diberi makan dengan larutan sukrosa 10% dan larutan sirup multivitamin 10%.Nyamuk betina rutin menghisap darah untuk bertelur.Betina berumur dua sampai lima hari yang belum diberi makan darah dapat digunakan terus menerus dalam pengujian biologis eksperimental dewasa.
Bioassay respon dosis-mortalitas EO dilakukan pada nyamuk Aedes betina dewasa.aegypti, MCM-S dan PMD-R menggunakan metode topikal yang dimodifikasi sesuai dengan protokol standar WHO untuk pengujian kerentanan [42].EO dari masing-masing tanaman diencerkan secara serial dengan pelarut yang sesuai (misalnya etanol atau aseton) untuk mendapatkan serangkaian konsentrasi 4-6.Setelah dibius dengan karbon dioksida (CO2), nyamuk ditimbang satu per satu.Nyamuk yang telah dianestesi kemudian dibiarkan tidak bergerak di atas kertas saring kering pada pelat dingin khusus di bawah mikroskop stereo untuk mencegah pengaktifan kembali selama prosedur.Untuk setiap perlakuan, 0,1 μl larutan EO diaplikasikan pada pronotum atas betina menggunakan mikrodispenser genggam Hamilton (700 Series Microliter™, Hamilton Company, Reno, NV, USA).Dua puluh lima perempuan diobati dengan masing-masing konsentrasi, dengan angka kematian berkisar antara 10% hingga 95% untuk setidaknya 4 konsentrasi berbeda.Nyamuk yang diberi pelarut berfungsi sebagai kontrol.Untuk mencegah kontaminasi sampel uji, ganti kertas saring dengan kertas saring baru untuk setiap EO yang diuji.Dosis yang digunakan dalam bioassay ini dinyatakan dalam mikrogram EO per miligram berat badan wanita hidup.Aktivitas PBO dewasa juga dinilai dengan cara yang mirip dengan EO, dengan PBO digunakan sebagai kontrol positif dalam eksperimen sinergis.Nyamuk yang diberi perlakuan pada semua kelompok ditempatkan dalam gelas plastik dan diberi sukrosa 10% ditambah sirup multivitamin 10%.Semua bioassay dilakukan pada suhu 25 ± 2 °C dan kelembaban relatif 80 ± 10% dan diulang empat kali dengan kontrol.Kematian selama masa pemeliharaan 24 jam diperiksa dan dipastikan dengan kurangnya respon nyamuk terhadap rangsangan mekanis dan kemudian dicatat berdasarkan rata-rata empat ulangan.Perlakuan eksperimental diulang empat kali untuk setiap sampel uji dengan menggunakan kelompok nyamuk yang berbeda.Hasilnya dirangkum dan digunakan untuk menghitung persentase angka kematian, yang digunakan untuk menentukan dosis mematikan 24 jam dengan analisis probit.
Efek antisida sinergis dari EO dan permetrin dinilai menggunakan prosedur uji toksisitas lokal [42] seperti yang dijelaskan sebelumnya.Gunakan aseton atau etanol sebagai pelarut untuk membuat permetrin pada konsentrasi yang diinginkan, serta campuran biner EO dan permetrin (EO-permetrin: permetrin dicampur dengan EO pada konsentrasi LD25).Alat uji (permetrin dan EO-permetrin) dievaluasi terhadap strain MCM-S dan PMD-R Ae.Aedes aegypti.Masing-masing dari 25 nyamuk betina diberi empat dosis permetrin untuk menguji efektivitasnya dalam membunuh nyamuk dewasa, dengan masing-masing pengobatan diulang empat kali.Untuk mengidentifikasi kandidat sinergis EO, 4 hingga 6 dosis EO-permetrin diberikan kepada masing-masing 25 nyamuk betina, dengan setiap aplikasi diulang empat kali.Perlakuan PBO-permetrin (permetrin dicampur dengan konsentrasi LD25 PBO) juga berfungsi sebagai kontrol positif.Dosis yang digunakan dalam bioassay ini dinyatakan dalam nanogram sampel uji per miligram berat badan hidup betina.Empat evaluasi eksperimental untuk setiap jenis nyamuk dilakukan pada kelompok yang dipelihara secara individual, dan data kematian dikumpulkan dan dianalisis menggunakan Probit untuk menentukan dosis mematikan dalam 24 jam.
Angka kematian disesuaikan dengan menggunakan rumus Abbott [43].Data yang disesuaikan dianalisis dengan analisis regresi Probit menggunakan program statistik komputer SPSS (versi 19.0).Nilai mematikan 25%, 50%, 90%, 95% dan 99% (masing-masing LD25, LD50, LD90, LD95 dan LD99) dihitung menggunakan interval kepercayaan 95% yang sesuai (95% CI).Pengukuran signifikansi dan perbedaan antara sampel uji dinilai menggunakan uji chi-square atau uji Mann-Whitney U dalam setiap pengujian biologis.Hasil dianggap signifikan secara statistik pada P<0,05.Koefisien resistensi (RR) diperkirakan pada level LD50 menggunakan rumus berikut [12]:
RR > 1 menunjukkan resistensi, dan RR ≤ 1 menunjukkan sensitivitas.Nilai rasio sinergi (SR) masing-masing calon sinergi dihitung sebagai berikut [34, 35, 44]:
Faktor ini membagi hasil menjadi tiga kategori: nilai SR 1±0,05 dianggap tidak berpengaruh nyata, nilai SR >1,05 dianggap mempunyai efek sinergis, dan nilai SR minyak cair berwarna kuning muda dapat diperoleh dengan penyulingan uap rimpang C. rotundus dan A. galanga serta kulit batang C. verum.Hasil yang dihitung berdasarkan berat kering adalah 0,15%, 0,27% (b/b), dan 0,54% (v/v).w) masing-masing (Tabel 1).Studi GC-MS terhadap komposisi kimia minyak C. rotundus, A. galanga dan C. verum menunjukkan adanya 19, 17 dan 21 senyawa, yang masing-masing menyumbang 80,22, 86,75 dan 97,24% dari seluruh komponen (Tabel 2 ).Senyawa minyak rimpang C. lucidum terutama terdiri dari siperonena (14,04%), diikuti oleh karralena (9,57%), α-capsellan (7,97%), dan α-capsellan (7,53%).Komponen kimia utama minyak rimpang lengkuas adalah β-bisabolene (18,27%), diikuti oleh α-bergamotene (16,28%), 1,8-cineole (10,17%) dan piperonol (10,09%).Sementara sinamaldehida (64,66%) diidentifikasi sebagai komponen utama minyak kulit kayu C. verum, sinamat asetat (6,61%), α-copaene (5,83%) dan 3-fenilpropionaldehida (4,09%) dianggap sebagai bahan minor.Struktur kimia cyperne, β-bisabolene dan cinnamaldehyde masing-masing merupakan senyawa utama C. rotundus, A. galanga dan C. verum seperti terlihat pada Gambar 2.
Hasil dari tiga OO menilai aktivitas orang dewasa terhadap nyamuk Aedes.nyamuk aegypti ditunjukkan pada Tabel 3. Seluruh EO ditemukan mempunyai efek mematikan terhadap nyamuk MCM-S Aedes pada jenis dan dosis yang berbeda.Aedes aegypti.EO yang paling efektif adalah C. verum, diikuti oleh A. galanga dan C. rotundus dengan nilai LD50 masing-masing 3,30, 7,97 dan 10,05 μg/mg MCM-S betina, sedikit lebih tinggi dari 3,22 (U = 1 ), Z = -0,775, P = 0,667), 7,94 (U = 2, Z = 0, P = 1) dan 9,57 (U = 0, Z = -1,549, P = 0,333) μg/mg PMD -R pada wanita.Hal ini sesuai dengan PBO yang memiliki efek dewasa yang sedikit lebih tinggi terhadap PMD-R dibandingkan strain MSM-S, dengan nilai LD50 masing-masing sebesar 4,79 dan 6,30 μg/mg pada wanita (U = 0, Z = -2,021, P = 0,057). .).Dapat dihitung bahwa nilai LD50 C. verum, A. galanga, C. rotundus dan PBO terhadap PMD-R masing-masing sekitar 0,98, 0,99, 0,95 dan 0,76 kali lebih rendah dibandingkan terhadap MCM-S.Dengan demikian, hal ini menunjukkan bahwa kerentanan terhadap PBO dan EO relatif sama antara kedua strain Aedes tersebut.Meskipun PMD-R lebih rentan dibandingkan MCM-S, namun sensitivitas Aedes aegypti tidak signifikan.Sebaliknya, kedua strain Aedes sangat berbeda dalam sensitivitasnya terhadap permetrin.aegypti (Tabel 4).PMD-R menunjukkan resistensi yang signifikan terhadap permetrin (nilai LD50 = 0,44 ng/mg pada wanita) dengan nilai LD50 lebih tinggi yaitu 3,70 dibandingkan dengan MCM-S (nilai LD50 = 0,44 ng/mg pada wanita ) ng/mg pada wanita (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029).Meskipun PMD-R kurang sensitif terhadap permetrin dibandingkan MCM-S, sensitivitasnya terhadap minyak PBO dan C. verum, A. galanga, dan C. rotundus sedikit lebih tinggi dibandingkan MCM-S.
Seperti yang diamati dalam bioassay populasi orang dewasa dari kombinasi EO-permetrin, campuran biner permetrin dan EO (LD25) menunjukkan sinergi (nilai SR > 1,05) atau tidak berpengaruh (nilai SR = 1 ± 0,05).Efek dewasa yang kompleks dari campuran EO-permetrin pada nyamuk albino eksperimental.Aedes aegypti strain MCM-S dan PMD-R ditunjukkan pada Tabel 4 dan Gambar 3. Penambahan minyak C. verum ditemukan sedikit menurunkan LD50 permetrin terhadap MCM-S dan sedikit meningkatkan LD50 terhadap PMD-R menjadi 0,44– 0,42 ng/mg pada wanita dan 3,70 hingga 3,85 ng/mg pada wanita.Sebaliknya, penambahan minyak C. rotundus dan A. galanga secara signifikan menurunkan LD50 permetrin pada MCM-S dari 0,44 menjadi 0,07 (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029) dan menjadi 0,11 (U = 0 )., Z) = -2,309, P = 0,029) ng/mg wanita.Berdasarkan nilai LD50 MCM-S, nilai SR campuran EO-permetrin setelah penambahan minyak C. rotundus dan A. galanga masing-masing sebesar 6,28 dan 4,00.Dengan demikian, LD50 permetrin terhadap PMD-R menurun secara signifikan dari 3,70 menjadi 0,42 (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029) dan menjadi 0,003 dengan penambahan minyak C. rotundus dan A. galanga (U = 0). ., Z = -2,337, P = 0,029) ng/mg perempuan.Nilai SR campuran permetrin C. rotundus terhadap PMD-R sebesar 8,81, sedangkan nilai SR campuran lengkuas-permetrin sebesar 1233,33.Dibandingkan dengan MCM-S, nilai LD50 PBO kontrol positif menurun dari 0,44 menjadi 0,26 ng/mg (betina) dan dari 3,70 ng/mg (betina) menjadi 0,65 ng/mg (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029) dan PMD-R (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029).Nilai SR campuran PBO-permetrin untuk strain MCM-S dan PMD-R masing-masing sebesar 1,69 dan 5,69.Hasil ini menunjukkan bahwa minyak C. rotundus dan A. galanga serta PBO meningkatkan toksisitas permetrin lebih besar dibandingkan minyak C. verum untuk strain MCM-S dan PMD-R.
Aktivitas dewasa (LD50) EO, PBO, permetrin (PE) dan kombinasinya terhadap strain nyamuk Aedes yang sensitif terhadap piretroid (MCM-S) dan resisten (PMD-R).Aedes aegypti
[45].Piretroid sintetik digunakan di seluruh dunia untuk mengendalikan hampir semua arthropoda yang penting dalam bidang pertanian dan medis.Namun, karena dampak buruk dari penggunaan insektisida sintetik, terutama dalam kaitannya dengan perkembangan dan meluasnya resistensi nyamuk, serta dampaknya terhadap kesehatan jangka panjang dan lingkungan, maka kini terdapat kebutuhan mendesak untuk mengurangi penggunaan insektisida sintetik. insektisida sintetis tradisional dan mengembangkan alternatif [35, 46, 47].Selain melindungi lingkungan dan kesehatan manusia, keunggulan insektisida nabati antara lain selektivitas yang tinggi, ketersediaan global, serta kemudahan produksi dan penggunaan, sehingga lebih menarik untuk pengendalian nyamuk [32,48, 49].Penelitian ini, selain menjelaskan karakteristik kimia minyak atsiri yang efektif melalui analisis GC-MS, juga menilai potensi minyak atsiri dewasa dan kemampuannya dalam meningkatkan toksisitas permetrin sintetik.aegypti pada strain sensitif piretroid (MCM-S) dan strain resisten (PMD-R).
Karakterisasi GC-MS menunjukkan bahwa cypern (14,04%), β-bisabolene (18,27%) dan cinnamaldehyde (64,66%) masing-masing merupakan komponen utama minyak C. rotundus, A. galanga dan C. verum.Bahan kimia ini telah menunjukkan beragam aktivitas biologis.Ahn dkk.[50] melaporkan bahwa 6-acetoxycyperene, diisolasi dari rimpang C. rotundus, bertindak sebagai senyawa antitumor dan dapat menginduksi apoptosis yang bergantung pada caspase pada sel kanker ovarium.β-Bisabolene, diekstraksi dari minyak esensial pohon mur, menunjukkan sitotoksisitas spesifik terhadap sel tumor payudara manusia dan tikus baik in vitro dan in vivo [51].Cinnamaldehyde, yang diperoleh dari ekstrak alami atau disintesis di laboratorium, telah dilaporkan memiliki aktivitas insektisida, antibakteri, antijamur, antiinflamasi, imunomodulator, antikanker, dan antiangiogenik [52].
Hasil bioassay aktivitas dewasa yang bergantung pada dosis menunjukkan potensi yang baik dari EO yang diuji dan menunjukkan bahwa nyamuk Aedes strain MCM-S dan PMD-R memiliki kerentanan yang sama terhadap EO dan PBO.Aedes aegypti.Perbandingan efektivitas EO dan permetrin menunjukkan bahwa permetrin memiliki efek alergi yang lebih kuat: nilai LD50 adalah 0,44 dan 3,70 ng/mg pada wanita untuk strain MCM-S dan PMD-R.Temuan ini didukung oleh banyak penelitian yang menunjukkan bahwa pestisida alami, terutama produk yang berasal dari tumbuhan, umumnya kurang efektif dibandingkan zat sintetis [31, 34, 35, 53, 54].Hal ini mungkin karena bahan aktif merupakan kombinasi kompleks dari bahan aktif atau tidak aktif, sedangkan bahan tidak aktif merupakan senyawa aktif tunggal yang dimurnikan.Namun, keragaman dan kompleksitas bahan aktif alami dengan mekanisme aksi yang berbeda dapat meningkatkan aktivitas biologis atau menghambat perkembangan resistensi pada populasi inang [55, 56, 57].Banyak peneliti telah melaporkan potensi anti nyamuk C. verum, A. galanga dan C. rotundus serta komponennya seperti β-bisabolene, cinnamaldehyde dan 1,8-cineole [22, 36, 58, 59, 60,61, 62,63 ,64].Namun, tinjauan literatur mengungkapkan bahwa belum ada laporan sebelumnya mengenai efek sinergisnya dengan permetrin atau insektisida sintetis lainnya terhadap nyamuk Aedes.Aedes aegypti.
Dalam penelitian ini, perbedaan signifikan dalam kerentanan permetrin diamati antara kedua strain Aedes.Aedes aegypti.MCM-S sensitif terhadap permetrin, sedangkan PMD-R kurang sensitif terhadap permetrin, dengan tingkat resistensi 8,41.Dibandingkan dengan sensitivitas MCM-S, PMD-R kurang sensitif terhadap permetrin tetapi lebih sensitif terhadap EO, sehingga memberikan dasar untuk penelitian lebih lanjut yang bertujuan untuk meningkatkan efektivitas permetrin dengan menggabungkannya dengan EO.Bioassay berbasis kombinasi sinergis untuk efek dewasa menunjukkan bahwa campuran biner EO dan permetrin mengurangi atau meningkatkan kematian Aedes dewasa.Aedes aegypti.Penambahan minyak C. verum sedikit menurunkan LD50 permetrin terhadap MCM-S namun sedikit meningkatkan LD50 terhadap PMD-R dengan nilai SR masing-masing sebesar 1,05 dan 0,96.Hal ini menunjukkan bahwa minyak C. verum tidak mempunyai efek sinergis atau antagonis terhadap permetrin saat diuji pada MCM-S dan PMD-R.Sebaliknya minyak C. rotundus dan A. galanga menunjukkan efek sinergis yang signifikan dengan menurunkan nilai LD50 permetrin secara signifikan pada MCM-S atau PMD-R.Bila permetrin dikombinasikan dengan EO C. rotundus dan A. galanga, diperoleh nilai SR campuran EO-permetrin untuk MCM-S masing-masing sebesar 6,28 dan 4,00.Selain itu, ketika permetrin dievaluasi terhadap PMD-R dalam kombinasi dengan C. rotundus (SR = 8.81) atau A. galanga (SR = 1233.33), nilai SR meningkat secara signifikan.Perlu dicatat bahwa C. rotundus dan A. galanga meningkatkan toksisitas permetrin terhadap PMD-R Ae.aegypti secara signifikan.Demikian pula, PBO ditemukan meningkatkan toksisitas permetrin dengan nilai SR masing-masing 1,69 dan 5,69 untuk strain MCM-S dan PMD-R.Karena C. rotundus dan A. galanga memiliki nilai SR tertinggi, keduanya dianggap sebagai sinergi terbaik dalam meningkatkan toksisitas permetrin pada MCM-S dan PMD-R.
Beberapa penelitian sebelumnya telah melaporkan efek sinergis kombinasi insektisida sintetik dan ekstrak tumbuhan terhadap berbagai spesies nyamuk.Uji hayati larvasida terhadap Anopheles Stephensi yang dipelajari oleh Kalayanasundaram dan Das [65] menunjukkan bahwa fenthion, suatu organofosfat berspektrum luas, dikaitkan dengan Cleodendron inerme, Pedalium murax dan Parthenium hysterophorus.Sinergi yang signifikan diamati antara ekstrak dengan efek sinergis (SF) sebesar 1,31., 1,38, 1,40, 1,48, 1,61 dan 2,23, masing-masing.Dalam skrining larvasida terhadap 15 spesies bakau, ekstrak petroleum eter dari akar bakau ditemukan paling efektif melawan Culex quinquefasciatus dengan nilai LC50 25,7 mg/L [66].Efek sinergis ekstrak ini dan insektisida botani piretrum juga dilaporkan dapat menurunkan LC50 piretrum terhadap larva C. quinquefasciatus dari 0,132 mg/L menjadi 0,107 mg/L, selain itu digunakan perhitungan SF sebesar 1,23 pada penelitian ini.34,35,44].Efektivitas gabungan ekstrak akar sitron Solanum dan beberapa insektisida sintetik (misalnya fenthion, sipermetrin (suatu piretroid sintetik) dan timethphos (larvisida organofosfor)) terhadap nyamuk Anopheles telah dievaluasi.Stephensi [54] dan C. quinquefasciatus [34].Kombinasi penggunaan sipermetrin dan ekstrak petroleum eter buah kuning menunjukkan efek sinergis terhadap sipermetrin di semua rasio.Rasio yang paling efektif adalah kombinasi biner 1:1 dengan nilai LC50 dan SF masing-masing sebesar 0,0054 ppm dan 6,83 terhadap An.Stephen Barat[54].Sementara campuran biner S. xanthocarpum dan temephos bersifat antagonis (SF = 0,6406) dengan perbandingan 1:1, kombinasi S. xanthocarpum-fenthion (1:1) menunjukkan aktivitas sinergis terhadap C. quinquefasciatus dengan SF 1,3125 [34]].Tong dan Blomquist [35] mempelajari efek etilen oksida tanaman terhadap toksisitas karbaril (karbamat spektrum luas) dan permetrin terhadap nyamuk Aedes.Aedes aegypti.Hasil penelitian menunjukkan bahwa etilen oksida dari agar, lada hitam, juniper, helichrysum, cendana dan wijen meningkatkan toksisitas karbaril terhadap nyamuk Aedes.Nilai SR larva aegypti bervariasi antara 1,0 hingga 7,0.Sebaliknya, tidak ada satu pun EO yang beracun bagi nyamuk Aedes dewasa.Pada tahap ini, belum ada efek sinergis yang dilaporkan untuk kombinasi Aedes aegypti dan EO-carbaryl.PBO digunakan sebagai kontrol positif untuk meningkatkan toksisitas karbaril terhadap nyamuk Aedes.Nilai SR larva dan dewasa Aedes aegypti masing-masing sebesar 4,9-9,5 dan 2,3.Hanya campuran biner permetrin dan EO atau PBO yang diuji aktivitas larvasidanya.Campuran EO-permetrin mempunyai efek antagonis, sedangkan campuran PBO-permetrin mempunyai efek sinergis terhadap nyamuk Aedes.Larva Aedes aegypti.Namun, percobaan respons dosis dan evaluasi SR untuk campuran PBO-permetrin belum dilakukan.Meskipun hanya sedikit hasil yang telah dicapai mengenai efek sinergis dari kombinasi fitosintesis terhadap vektor nyamuk, data ini mendukung hasil yang ada, yang membuka prospek penambahan sinergis tidak hanya untuk mengurangi dosis yang diberikan, namun juga untuk meningkatkan efek membunuh.Efisiensi serangga.Selain itu, hasil penelitian ini menunjukkan untuk pertama kalinya bahwa minyak C. rotundus dan A. galanga secara sinergis memberikan khasiat yang jauh lebih tinggi terhadap strain nyamuk Aedes yang rentan terhadap piretroid dan resisten terhadap piretroid dibandingkan dengan PBO bila dikombinasikan dengan toksisitas permetrin.Aedes aegypti.Namun, hasil yang tidak terduga dari analisis sinergis menunjukkan bahwa minyak C. verum memiliki aktivitas anti-dewasa terbesar terhadap kedua strain Aedes.Anehnya, efek toksik permetrin terhadap Aedes aegypti tidak memuaskan.Variasi dalam efek toksik dan efek sinergis mungkin disebabkan oleh paparan berbagai jenis dan tingkat komponen bioaktif dalam minyak ini.
Meskipun ada upaya untuk memahami cara meningkatkan efisiensi, mekanisme sinergisnya masih belum jelas.Alasan yang mungkin menyebabkan perbedaan khasiat dan potensi sinergis mungkin mencakup perbedaan komposisi kimia produk yang diuji dan perbedaan kerentanan nyamuk terkait dengan status resistensi dan perkembangannya.Terdapat perbedaan antara komponen etilen oksida mayor dan minor yang diuji dalam penelitian ini, dan beberapa senyawa ini terbukti mempunyai efek penolak dan toksik terhadap berbagai hama dan vektor penyakit [61,62,64,67,68].Namun, senyawa utama yang dikarakterisasi dalam minyak C. rotundus, A. galanga dan C. verum, seperti cypern, β-bisabolene dan cinnamaldehyde, tidak diuji dalam makalah ini untuk aktivitas anti-dewasa dan sinergisnya terhadap Ae.Aedes aegypti.Oleh karena itu, penelitian di masa depan diperlukan untuk mengisolasi bahan aktif yang ada dalam setiap minyak esensial dan menjelaskan kemanjuran insektisida dan interaksi sinergisnya terhadap vektor nyamuk ini.Secara umum aktivitas insektisida bergantung pada aksi dan reaksi antara racun dan jaringan serangga, yang dapat disederhanakan dan dibagi menjadi tiga tahap: penetrasi ke dalam kulit tubuh serangga dan membran organ target, aktivasi (= interaksi dengan target) dan detoksifikasi.zat beracun [57, 69].Oleh karena itu, sinergi insektisida yang menghasilkan peningkatan efektivitas kombinasi racun memerlukan setidaknya satu dari kategori ini, seperti peningkatan penetrasi, aktivasi senyawa yang terakumulasi lebih besar, atau penurunan detoksifikasi bahan aktif pestisida yang lebih sedikit.Misalnya, toleransi energi menunda penetrasi kutikula melalui kutikula yang menebal dan resistensi biokimia, seperti peningkatan metabolisme insektisida yang diamati pada beberapa strain serangga yang resisten [70, 71].Efektivitas EO yang signifikan dalam meningkatkan toksisitas permetrin, terutama terhadap PMD-R, dapat mengindikasikan solusi terhadap masalah resistensi insektisida melalui interaksi dengan mekanisme resistensi [57, 69, 70, 71].Tong dan Blomquist [35] mendukung hasil penelitian ini dengan menunjukkan interaksi sinergis antara EO dan pestisida sintetis.aegypti, terdapat bukti aktivitas penghambatan terhadap enzim detoksifikasi, termasuk sitokrom P450 monooksigenase dan karboksilesterase, yang terkait erat dengan perkembangan resistensi terhadap pestisida tradisional.PBO tidak hanya dikatakan sebagai penghambat metabolik sitokrom P450 monooksigenase tetapi juga meningkatkan penetrasi insektisida, seperti yang ditunjukkan oleh penggunaannya sebagai kontrol positif dalam studi sinergis [35, 72].Menariknya, 1,8-cineole, salah satu komponen penting yang ditemukan dalam minyak lengkuas, dikenal karena efek toksiknya terhadap spesies serangga [22, 63, 73] dan telah dilaporkan memiliki efek sinergis di beberapa bidang penelitian aktivitas biologis [22, 63, 73] 74]..,75,76,77].Selain itu, 1,8-cineole dalam kombinasi dengan berbagai obat termasuk kurkumin [78], 5-fluorouracil [79], asam mefenamat [80] dan zidovudine [81] juga memiliki efek meningkatkan permeasi.secara in vitro.Dengan demikian, kemungkinan peran 1,8-cineole dalam aksi insektisida sinergis tidak hanya sebagai bahan aktif tetapi juga sebagai penambah penetrasi.Karena sinergi yang lebih besar dengan permetrin, terutama terhadap PMD-R, efek sinergis minyak lengkuas dan minyak trichosanthes yang diamati dalam penelitian ini mungkin disebabkan oleh interaksi dengan mekanisme resistensi, yaitu peningkatan permeabilitas terhadap klorin.Piretroid meningkatkan aktivasi senyawa yang terakumulasi dan menghambat enzim detoksifikasi seperti sitokrom P450 monooksigenase dan karboksilesterase.Namun, aspek-aspek ini memerlukan studi lebih lanjut untuk menjelaskan peran spesifik EO dan senyawa terisolasinya (secara terpisah atau dalam kombinasi) dalam mekanisme sinergis.
Pada tahun 1977, peningkatan tingkat resistensi permetrin dilaporkan pada populasi vektor utama di Thailand, dan selama beberapa dekade berikutnya, penggunaan permetrin sebagian besar digantikan oleh bahan kimia piretroid lainnya, terutama yang digantikan oleh deltametrin [82].Namun, resistensi vektor terhadap deltametrin dan kelas insektisida lainnya sangat umum terjadi di seluruh negeri karena penggunaan yang berlebihan dan terus-menerus [14, 17, 83, 84, 85, 86].Untuk mengatasi masalah ini, disarankan untuk merotasi atau menggunakan kembali pestisida bekas yang sebelumnya efektif dan kurang beracun bagi mamalia, seperti permetrin.Saat ini, meskipun penggunaan permetrin telah dikurangi dalam program pengendalian nyamuk pemerintah nasional, resistensi permetrin masih ditemukan pada populasi nyamuk.Hal ini mungkin disebabkan oleh paparan nyamuk terhadap produk pengendalian hama rumah tangga komersial, yang sebagian besar terdiri dari permetrin dan piretroid lainnya [14, 17].Oleh karena itu, keberhasilan penggunaan kembali permetrin memerlukan pengembangan dan penerapan strategi untuk mengurangi resistensi vektor.Meskipun tidak ada minyak atsiri yang diuji secara individual dalam penelitian ini yang seefektif permetrin, kerja sama dengan permetrin menghasilkan efek sinergis yang mengesankan.Hal ini merupakan indikasi yang menjanjikan bahwa interaksi EO dengan mekanisme resistensi menghasilkan kombinasi permetrin dengan EO lebih efektif dibandingkan insektisida atau EO saja, khususnya terhadap PMD-R Ae.Aedes aegypti.Manfaat dari campuran sinergis dalam meningkatkan kemanjuran, meskipun penggunaan dosis yang lebih rendah untuk pengendalian vektor, dapat mengarah pada peningkatan manajemen resistensi dan pengurangan biaya [33, 87].Dari hasil ini, menarik untuk dicatat bahwa EO A. galanga dan C. rotundus secara signifikan lebih efektif dibandingkan PBO dalam mensinergikan toksisitas permetrin pada strain MCM-S dan PMD-R dan merupakan alternatif potensial terhadap alat bantu ergogenik tradisional.
EO terpilih memiliki efek sinergis yang signifikan dalam meningkatkan toksisitas orang dewasa terhadap PMD-R Ae.aegypti khususnya minyak lengkuas mempunyai nilai SR hingga 1233.33 yang menunjukkan bahwa EO mempunyai potensi yang luas sebagai sinergis dalam meningkatkan efektivitas permetrin.Hal ini mungkin merangsang penggunaan produk alami aktif baru, yang bersama-sama dapat meningkatkan penggunaan produk pengendalian nyamuk yang sangat efektif.Hal ini juga mengungkapkan potensi etilen oksida sebagai alternatif sinergis yang secara efektif memperbaiki insektisida lama atau tradisional guna mengatasi masalah resistensi yang ada pada populasi nyamuk.Penggunaan tanaman yang tersedia dalam program pengendalian nyamuk tidak hanya mengurangi ketergantungan pada bahan-bahan impor dan mahal, namun juga merangsang upaya lokal untuk memperkuat sistem kesehatan masyarakat.
Hasil ini jelas menunjukkan efek sinergis signifikan yang dihasilkan oleh kombinasi etilen oksida dan permetrin.Hasilnya menyoroti potensi etilen oksida sebagai tanaman sinergis dalam pengendalian nyamuk, meningkatkan efektivitas permetrin terhadap nyamuk, terutama pada populasi yang resisten.Perkembangan dan penelitian di masa depan akan memerlukan bioanalisis sinergis minyak lengkuas dan alpinia serta senyawa terisolasinya, kombinasi insektisida yang berasal dari alam atau sintetik terhadap berbagai spesies dan stadium nyamuk, dan uji toksisitas terhadap organisme non-target.Penggunaan praktis etilen oksida sebagai sinergis alternatif yang layak.
Organisasi Kesehatan Dunia.Strategi global untuk pencegahan dan pengendalian demam berdarah 2012–2020.Jenewa: Organisasi Kesehatan Dunia, 2012.
Weaver SC, Costa F., Garcia-Blanco MA, Ko AI, Ribeiro GS, Saade G., dkk.Virus Zika: sejarah, kemunculan, biologi dan prospek pengendalian.Penelitian antivirus.2016;130:69–80.
Organisasi Kesehatan Dunia.Lembar Fakta Demam Berdarah.2016.http://www.searo.who.int/entity/vector_borne_tropical_diseases/data/data_factsheet/en/.Tanggal diakses: 20 Januari 2017
Departemen Kesehatan Masyarakat.Status terkini kasus demam berdarah dan demam berdarah dengue di Thailand.2016.http://www.m-society.go.th/article_attach/13996/17856.pdf.Tanggal diakses: 6 Januari 2017
Ooi EE, Goh CT, Gabler DJ.35 tahun pencegahan demam berdarah dan pengendalian vektor di Singapura.Penyakit menular yang tiba-tiba.2006;12:887–93.
Morrison AC, Zielinski-Gutierrez E, Scott TW, Rosenberg R. Mengidentifikasi tantangan dan mengusulkan solusi untuk mengendalikan vektor virus Aedes aegypti.Kedokteran PLOS.2008;5:362–6.
Pusat Pengendalian dan Pencegahan Penyakit.Demam berdarah, entomologi dan ekologi.2016. http://www.cdc.gov/dengue/entomologyecology/.Tanggal diakses: 6 Januari 2017
Ohimain EI, Angaye TKN, Bassey SE Perbandingan aktivitas larvasida daun, kulit kayu, batang dan akar Jatropa curcas (Euphorbiaceae) terhadap vektor malaria Anopheles gambiae.SZhBR.2014;3:29-32.
Soleimani-Ahmadi M, Watandoust H, Zareh M. Karakteristik habitat larva Anopheles di daerah malaria program pemberantasan malaria di Iran tenggara.Biomed J Trop Asia Pasifik.2014;4(Tambahan 1):S73–80.
Bellini R, Zeller H, Van Bortel W. Tinjauan pendekatan pengendalian vektor, pencegahan dan pengendalian wabah virus West Nile, dan tantangan yang dihadapi Eropa.Vektor parasit.2014;7:323.
Muthusamy R., Shivakumar MS Seleksi dan mekanisme molekuler resistensi sipermetrin pada ulat merah (Amsacta albistriga Walker).Fisiologi biokimia hama.2014;117:54–61.
Ramkumar G., Shivakumar MS Studi laboratorium resistensi permetrin dan resistensi silang Culex quinquefasciatus terhadap insektisida lain.Pusat Penelitian Palastor.2015;114:2553–60.
Matsunaka S, Hutson DH, Murphy SD.Kimia Pestisida: Kesejahteraan Manusia dan Lingkungan, Vol.3: Mekanisme kerja, metabolisme dan toksikologi.New York: Pergamon Tekan, 1983.
Chareonviriyaphap T, Bangs MJ, Souvonkert V, Kongmi M, Korbel AV, Ngoen-Klan R. Tinjauan resistensi insektisida dan perilaku penghindaran vektor penyakit manusia di Thailand.Vektor parasit.2013;6:280.
Chareonviriyaphap T, Aum-Aung B, Ratanatham S. Pola resistensi insektisida saat ini di antara vektor nyamuk di Thailand.Kesehatan Masyarakat J Trop Med Asia Tenggara.1999;30:184-94.
Chareonviriyaphap T, Bangs MJ, Ratanatham S. Status malaria di Thailand.Kesehatan Masyarakat J Trop Med Asia Tenggara.2000;31:225–37.
Plernsub S, Saingamsuk J, Yanola J, Lumjuan N, Thippavankosol P, Walton S, Somboon P. Frekuensi temporal mutasi resistensi knockdown F1534C dan V1016G pada nyamuk Aedes aegypti di Chiang Mai, Thailand, dan dampak mutasi terhadap efisiensi semprotan kabut termal mengandung piretroid.Aktatrop.2016;162:125–32.
Vontas J, Kioulos E, Pavlidi N, Moru E, Della Torre A, Ranson H. Resistensi insektisida pada vektor utama demam berdarah Aedes albopictus dan Aedes aegypti.Fisiologi biokimia hama.2012;104:126–31.
Waktu posting: 08-Juli-2024