Dalam proyek sebelumnya yang menguji pabrik pengolahan makanan lokal untuk nyamuk di Thailand, minyak atsiri (EO) dari Cyperus rotundus, lengkuas dan kayu manis ditemukan memiliki aktivitas anti-nyamuk yang baik terhadap Aedes aegypti. Dalam upaya untuk mengurangi penggunaan bahan kimia tradisional,insektisidadan meningkatkan pengendalian populasi nyamuk yang resistan, penelitian ini bertujuan untuk mengidentifikasi potensi sinergisme antara efek adultisidal etilen oksida dan toksisitas permetrin terhadap nyamuk Aedes aegypti, termasuk strain yang resistan dan sensitif terhadap piretoid.
Untuk mengevaluasi komposisi kimia dan aktivitas membunuh EO yang diekstrak dari rimpang C. rotundus dan A. galanga serta kulit kayu C. verum terhadap strain Muang Chiang Mai yang rentan (MCM-S) dan strain Pang Mai Dang yang resisten (PMD-R). ) Nyamuk dewasa Aedes aegypti yang aktif. Bioassay dewasa dari campuran EO-permethrin juga dilakukan pada nyamuk Aedes ini untuk memahami aktivitas sinergisnya. strain aegypti.
Karakterisasi kimia menggunakan metode analisis GC-MS menunjukkan bahwa 48 senyawa diidentifikasi dari EO C. rotundus, A. galanga dan C. verum, yang masing-masing mencakup 80,22%, 86,75% dan 97,24% dari total komponen. Cyperene (14,04%), β-bisabolene (18,27%), dan cinnamaldehyde (64,66%) masing-masing merupakan komponen utama minyak cyperus, minyak lengkuas, dan minyak balsamik. Dalam uji biologis untuk membunuh nyamuk dewasa, EV C. rotundus, A. galanga dan C. verum efektif dalam membunuh Ae. Nilai LD50 nyamuk aedes aegypti, MCM-S dan PMD-R masing-masing adalah 10,05 dan 9,57 μg/mg betina, 7,97 dan 7,94 μg/mg betina, dan 3,30 dan 3,22 μg/mg betina. Khasiat MCM-S dan PMD-R Ae dalam membunuh nyamuk dewasa. aegypti dalam EO ini mendekati piperonil butoksida (nilai PBO, LD50 = 6,30 dan 4,79 μg/mg betina, masing-masing), tetapi tidak sejelas permetrin (nilai LD50 = 0,44 dan 3,70 ng/mg betina masing-masing). Akan tetapi, bioassay kombinasi menemukan sinergi antara EO dan permetrin. Sinergisme yang signifikan dengan permetrin terhadap dua strain nyamuk Aedes. Aedes aegypti tercatat dalam EM C. rotundus dan A. galanga. Penambahan minyak C. rotundus dan A. galanga secara signifikan menurunkan nilai LD50 permethrin pada MCM-S dari 0,44 menjadi 0,07 ng/mg dan 0,11 ng/mg pada betina, masing-masing dengan nilai sinergi rasio (SR) masing-masing 6,28 dan 4,00. Selain itu, EO C. rotundus dan A. galanga juga secara signifikan menurunkan nilai LD50 permethrin pada PMD-R dari 3,70 menjadi 0,42 ng/mg dan 0,003 ng/mg pada betina, masing-masing dengan nilai SR masing-masing 8,81 dan 1233,33.
Efek sinergis dari kombinasi EO-permethrin untuk meningkatkan toksisitas nyamuk dewasa terhadap dua galur nyamuk Aedes. Aedes aegypti menunjukkan peran etilen oksida yang menjanjikan sebagai sinergis dalam meningkatkan kemanjuran antinyamuk, terutama jika senyawa tradisional tidak efektif atau tidak sesuai.
Nyamuk Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) adalah vektor utama demam berdarah dan penyakit virus menular lainnya seperti demam kuning, chikungunya dan virus Zika, yang menimbulkan ancaman besar dan terus-menerus bagi manusia[1, 2]. Virus dengue adalah demam berdarah patogenik paling serius yang menyerang manusia, dengan perkiraan 5–100 juta kasus terjadi setiap tahun dan lebih dari 2,5 miliar orang di seluruh dunia berisiko [3]. Wabah penyakit menular ini memberikan beban besar pada populasi, sistem kesehatan, dan ekonomi di sebagian besar negara tropis [1]. Menurut Kementerian Kesehatan Thailand, ada 142.925 kasus demam berdarah dan 141 kematian yang dilaporkan secara nasional pada tahun 2015, lebih dari tiga kali lipat jumlah kasus dan kematian pada tahun 2014 [4]. Meskipun ada bukti historis, demam berdarah telah diberantas atau sangat dikurangi oleh nyamuk Aedes. Bahasa Indonesia: Setelah pengendalian Aedes aegypti [5], tingkat infeksi meningkat secara dramatis dan penyakit menyebar ke seluruh dunia, sebagian karena pemanasan global selama beberapa dekade. Pemberantasan dan pengendalian Ae. Aedes aegypti relatif sulit karena merupakan vektor nyamuk domestik yang kawin, makan, beristirahat, dan bertelur di dalam dan sekitar tempat tinggal manusia pada siang hari. Selain itu, nyamuk ini memiliki kemampuan untuk beradaptasi dengan perubahan lingkungan atau gangguan yang disebabkan oleh kejadian alam (seperti kekeringan) atau tindakan pengendalian manusia, dan dapat kembali ke jumlah aslinya [6, 7]. Karena vaksin terhadap demam berdarah baru-baru ini disetujui dan tidak ada pengobatan khusus untuk demam berdarah, pencegahan dan pengurangan risiko penularan demam berdarah sepenuhnya bergantung pada pengendalian vektor nyamuk dan menghilangkan kontak manusia dengan vektor.
Khususnya, penggunaan bahan kimia untuk pengendalian nyamuk kini memegang peranan penting dalam kesehatan masyarakat sebagai komponen penting dari manajemen vektor terpadu yang komprehensif. Metode kimia yang paling populer mencakup penggunaan insektisida rendah racun yang bekerja terhadap larva nyamuk (larvisida) dan nyamuk dewasa (adidocida). Pengendalian larva melalui pengurangan sumber dan penggunaan larvasida kimia secara teratur seperti organofosfat dan pengatur pertumbuhan serangga dianggap penting. Namun, dampak lingkungan yang merugikan yang terkait dengan pestisida sintetis dan pemeliharaannya yang padat karya dan kompleks tetap menjadi perhatian utama [8, 9]. Pengendalian vektor aktif tradisional, seperti pengendalian dewasa, tetap menjadi cara pengendalian yang paling efektif selama wabah virus karena dapat memberantas vektor penyakit menular dengan cepat dan dalam skala besar, serta mengurangi umur dan umur panjang populasi vektor lokal [3]. , 10]. Empat kelas insektisida kimia: organoklorin (hanya disebut DDT), organofosfat, karbamat, dan piretroid membentuk dasar program pengendalian vektor, dengan piretroid dianggap sebagai kelas yang paling berhasil. Mereka sangat efektif terhadap berbagai artropoda dan memiliki efektivitas rendah. toksisitas terhadap mamalia. Saat ini, piretroid sintetis merupakan mayoritas pestisida komersial, yang mencakup sekitar 25% dari pasar pestisida global [11, 12]. Permetrin dan deltametrin adalah insektisida piretroid spektrum luas yang telah digunakan di seluruh dunia selama beberapa dekade untuk mengendalikan berbagai hama yang penting bagi pertanian dan medis [13, 14]. Pada tahun 1950-an, DDT dipilih sebagai bahan kimia pilihan untuk program pengendalian nyamuk kesehatan masyarakat nasional Thailand. Setelah meluasnya penggunaan DDT di daerah-daerah endemis malaria, Thailand secara bertahap menghentikan penggunaan DDT antara tahun 1995 dan 2000 dan menggantinya dengan dua piretroid: permetrin dan deltametrin [15, 16]. Insektisida piretroid ini diperkenalkan pada awal tahun 1990-an untuk mengendalikan malaria dan demam berdarah, terutama melalui perawatan kelambu dan penggunaan kabut termal dan semprotan toksisitas sangat rendah [14, 17]. Namun, mereka telah kehilangan efektivitasnya karena resistensi nyamuk yang kuat dan kurangnya kepatuhan publik karena kekhawatiran tentang kesehatan masyarakat dan dampak lingkungan dari bahan kimia sintetis. Hal ini menimbulkan tantangan yang signifikan terhadap keberhasilan program pengendalian vektor ancaman [14, 18, 19]. Untuk membuat strategi lebih efektif, tindakan pencegahan yang tepat waktu dan tepat diperlukan. Prosedur manajemen yang direkomendasikan meliputi substitusi zat alami, rotasi bahan kimia dari kelas yang berbeda, penambahan sinergis, dan pencampuran bahan kimia atau aplikasi bahan kimia dari kelas yang berbeda secara bersamaan [14, 20, 21]. Oleh karena itu, ada kebutuhan mendesak untuk menemukan dan mengembangkan alternatif dan sinergis yang ramah lingkungan, nyaman dan efektif dan penelitian ini bertujuan untuk menjawab kebutuhan ini.
Insektisida yang berasal dari alam, terutama yang berbahan dasar tanaman, telah menunjukkan potensi dalam evaluasi alternatif pengendalian nyamuk saat ini dan masa depan [22, 23, 24]. Beberapa penelitian telah menunjukkan bahwa vektor nyamuk penting dapat dikendalikan dengan menggunakan produk tanaman, terutama minyak atsiri (EO), sebagai pembunuh nyamuk dewasa. Sifat pembunuh nyamuk dewasa terhadap beberapa spesies nyamuk penting telah ditemukan dalam banyak minyak nabati seperti seledri, jinten, zedoaria, adas manis, cabai, timi, Schinus terebinthifolia, Cymbopogon citratus, Cymbopogon schoenanthus, Cymbopogon giganteus, Chenopodium ambrosioides, Cochlospermum planchonii, Eucalyptus ter eticornis, Eucalyptus citriodora, Cananga odorata, dan Petroselinum Criscum [25,26,27,28,29,30]. Etilen oksida kini digunakan tidak hanya sendiri, tetapi juga dalam kombinasi dengan zat tanaman yang diekstrak atau pestisida sintetis yang ada, menghasilkan berbagai tingkat toksisitas. Kombinasi insektisida tradisional seperti organofosfat, karbamat, dan piretroid dengan etilen oksida/ekstrak tanaman bekerja secara sinergis atau antagonis dalam efek toksiknya dan telah terbukti efektif terhadap vektor penyakit dan hama [31,32,33,34,35]. Akan tetapi, sebagian besar penelitian tentang efek toksik sinergis dari kombinasi fitokimia dengan atau tanpa bahan kimia sintetis telah dilakukan pada vektor serangga dan hama pertanian, bukan pada nyamuk yang penting secara medis. Selain itu, sebagian besar penelitian tentang efek sinergis kombinasi insektisida tanaman-sintetis terhadap vektor nyamuk difokuskan pada efek larvasida.
Dalam studi sebelumnya yang dilakukan oleh penulis sebagai bagian dari proyek penelitian yang sedang berlangsung untuk menyaring intimisida dari tanaman pangan asli di Thailand, etilen oksida dari Cyperus rotundus, lengkuas, dan kayu manis ditemukan memiliki aktivitas potensial terhadap nyamuk dewasa Aedes. Mesir [36]. Oleh karena itu, studi ini bertujuan untuk mengevaluasi efektivitas EO yang diisolasi dari tanaman obat ini terhadap nyamuk Aedes. aegypti, termasuk galur yang resistan dan sensitif terhadap piretoid. Efek sinergis dari campuran biner etilen oksida dan piretoid sintetis dengan efikasi yang baik pada orang dewasa juga telah dianalisis untuk mengurangi penggunaan insektisida tradisional dan meningkatkan resistensi terhadap vektor nyamuk, terutama terhadap nyamuk Aedes. Aedes aegypti. Artikel ini melaporkan karakterisasi kimia minyak esensial yang efektif dan potensinya untuk meningkatkan toksisitas permetrin sintetis terhadap nyamuk Aedes. aegypti pada galur yang sensitif terhadap piretoid (MCM-S) dan galur yang resistan (PMD-R).
Rimpang C. rotundus dan A. galanga serta kulit kayu C. verum (Gbr. 1) yang digunakan untuk ekstraksi minyak atsiri dibeli dari pemasok obat herbal di Provinsi Chiang Mai, Thailand. Identifikasi ilmiah tanaman ini dicapai melalui konsultasi dengan Tn. James Franklin Maxwell, Ahli Botani Herbarium, Departemen Biologi, Fakultas Sains, Universitas Chiang Mai (CMU), Provinsi Chiang Mai, Thailand, dan ilmuwan Wannari Charoensap; di Departemen Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Carnegie Mellon, Ibu. Spesimen voucher setiap tanaman disimpan di Departemen Parasitologi di Sekolah Kedokteran Universitas Carnegie Mellon untuk penggunaan di masa mendatang.
Sampel tanaman dikeringkan di tempat teduh secara individual selama 3–5 hari di ruang terbuka dengan ventilasi aktif dan suhu sekitar sekitar 30 ± 5 °C untuk menghilangkan kadar air sebelum ekstraksi minyak esensial alami (EO). Sebanyak 250 g dari setiap bahan tanaman kering digiling secara mekanis menjadi bubuk kasar dan digunakan untuk mengisolasi minyak esensial (EO) dengan distilasi uap. Peralatan distilasi terdiri dari mantel pemanas listrik, labu alas bulat 3000 mL, kolom ekstraksi, kondensor, dan perangkat Cool Ace (Eyela Cool Ace CA-1112 CE, Tokyo Rikakikai Co. Ltd., Tokyo, Jepang). Tambahkan 1600 ml air suling dan 10-15 manik kaca ke dalam labu lalu panaskan hingga sekitar 100°C menggunakan pemanas listrik selama minimal 3 jam hingga distilasi selesai dan tidak ada lagi EO yang diproduksi. Lapisan EO dipisahkan dari fase air menggunakan corong pemisah, dikeringkan di atas natrium sulfat anhidrat (Na2SO4) dan disimpan dalam botol coklat tertutup rapat pada suhu 4°C sampai komposisi kimia dan aktivitas dewasa diperiksa.
Komposisi kimia minyak atsiri dilakukan bersamaan dengan bioassay untuk zat dewasa. Analisis kualitatif dilakukan menggunakan sistem GC-MS yang terdiri dari kromatografi gas Hewlett-Packard (Wilmington, CA, AS) 7890A yang dilengkapi dengan detektor selektif massa kuadrupol tunggal (Agilent Technologies, Wilmington, CA, AS) dan MSD 5975C (EI). (Agilent Technologies).
Kolom kromatografi – DB-5MS (30 m × ID 0,25 mm × ketebalan film 0,25 µm). Total waktu pengoperasian GC-MS adalah 20 menit. Kondisi analisisnya adalah suhu injektor dan jalur transfer masing-masing adalah 250 dan 280 °C; suhu tungku diatur untuk meningkat dari 50°C ke 250°C pada laju 10°C/menit, gas pembawa adalah helium; laju alir 1,0 ml/menit; volume injeksi adalah 0,2 µL (1/10% volume dalam CH2Cl2, rasio split 100:1); Sistem ionisasi elektron dengan energi ionisasi 70 eV digunakan untuk deteksi GC-MS. Rentang akuisisi adalah 50–550 satuan massa atom (sma) dan kecepatan pemindaian adalah 2,91 pemindaian per detik. Persentase relatif komponen dinyatakan sebagai persentase yang dinormalisasi berdasarkan luas puncak. Identifikasi bahan EO didasarkan pada indeks retensi (RI) mereka. RI dihitung menggunakan persamaan Van den Dool dan Kratz [37] untuk seri n-alkana (C8-C40) dan dibandingkan dengan indeks retensi dari literatur [38] dan basis data perpustakaan (NIST 2008 dan Wiley 8NO8). Identitas senyawa yang ditunjukkan, seperti struktur dan rumus molekul, dikonfirmasi dengan membandingkannya dengan sampel asli yang tersedia.
Standar analitis untuk permetrin sintetis dan piperonil butoksida (PBO, kontrol positif dalam studi sinergi) dibeli dari Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, AS). Kit pengujian orang dewasa dari Organisasi Kesehatan Dunia (WHO) dan dosis diagnostik kertas yang diresapi permetrin (0,75%) dibeli secara komersial dari Pusat Pengendalian Vektor WHO di Penang, Malaysia. Semua bahan kimia dan reagen lain yang digunakan bermutu analitis dan dibeli dari lembaga lokal di Provinsi Chiang Mai, Thailand.
Nyamuk yang digunakan sebagai organisme uji dalam bioassay dewasa adalah nyamuk laboratorium Aedes aegypti yang kawin bebas, termasuk strain Muang Chiang Mai yang rentan (MCM-S) dan strain Pang Mai Dang yang resistan (PMD-R). Strain MCM-S diperoleh dari sampel lokal yang dikumpulkan di daerah Muang Chiang Mai, Provinsi Chiang Mai, Thailand, dan telah dipelihara di ruang entomologi Departemen Parasitologi, Fakultas Kedokteran CMU, sejak tahun 1995 [39]. Strain PMD-R, yang ditemukan resistan terhadap permetrin, diisolasi dari nyamuk lapangan yang awalnya dikumpulkan dari Ban Pang Mai Dang, Distrik Mae Tang, Provinsi Chiang Mai, Thailand, dan telah dipelihara di lembaga yang sama sejak tahun 1997 [40]. Strain PMD-R ditumbuhkan di bawah tekanan selektif untuk mempertahankan tingkat resistensi dengan paparan intermiten terhadap 0,75% permetrin menggunakan kit deteksi WHO dengan beberapa modifikasi [41]. Setiap strain Ae. Aedes aegypti dikolonisasi secara individual di laboratorium bebas patogen pada suhu 25 ± 2 °C dan kelembapan relatif 80 ± 10% serta periode cahaya terang/gelap 14:10 jam. Sekitar 200 larva disimpan dalam nampan plastik (panjang 33 cm, lebar 28 cm, dan tinggi 9 cm) yang diisi dengan air ledeng dengan kepadatan 150–200 larva per nampan dan diberi makan dua kali sehari dengan biskuit anjing yang disterilkan. Cacing dewasa disimpan dalam kandang yang lembap dan terus diberi makan dengan larutan sukrosa berair 10% dan larutan sirup multivitamin 10%. Nyamuk betina secara teratur menghisap darah untuk bertelur. Nyamuk betina berusia dua hingga lima hari yang belum diberi makan darah dapat digunakan terus-menerus dalam uji biologis dewasa eksperimental.
Bioassay respons dosis-mortalitas EO dilakukan pada nyamuk betina dewasa Aedes aegypti, MCM-S dan PMD-R menggunakan metode topikal yang dimodifikasi menurut protokol standar WHO untuk pengujian kerentanan [42]. EO dari setiap tanaman diencerkan secara serial dengan pelarut yang sesuai (misalnya etanol atau aseton) untuk mendapatkan rangkaian bertingkat 4-6 konsentrasi. Setelah anestesi dengan karbon dioksida (CO2), nyamuk ditimbang satu per satu. Nyamuk yang dibius kemudian dibiarkan tidak bergerak di atas kertas saring kering pada pelat dingin khusus di bawah mikroskop stereo untuk mencegah reaktivasi selama prosedur. Untuk setiap perawatan, 0,1 μl larutan EO dioleskan ke pronotum atas betina menggunakan mikrodispenser genggam Hamilton (700 Series Microliter™, Hamilton Company, Reno, NV, AS). Dua puluh lima betina diobati dengan setiap konsentrasi, dengan mortalitas berkisar antara 10% hingga 95% untuk setidaknya 4 konsentrasi yang berbeda. Nyamuk yang diobati dengan pelarut berfungsi sebagai kontrol. Untuk mencegah kontaminasi sampel uji, ganti kertas saring dengan kertas saring baru untuk setiap EO yang diuji. Dosis yang digunakan dalam bioassay ini dinyatakan dalam mikrogram EO per miligram berat badan betina hidup. Aktivitas PBO dewasa juga dinilai dengan cara yang sama dengan EO, dengan PBO digunakan sebagai kontrol positif dalam percobaan sinergis. Nyamuk yang diobati di semua kelompok ditempatkan dalam gelas plastik dan diberi sukrosa 10% ditambah sirup multivitamin 10%. Semua bioassay dilakukan pada suhu 25 ± 2 °C dan kelembaban relatif 80 ± 10% dan diulang empat kali dengan kontrol. Mortalitas selama periode pemeliharaan 24 jam diperiksa dan dikonfirmasi oleh kurangnya respons nyamuk terhadap rangsangan mekanis dan kemudian dicatat berdasarkan rata-rata empat replikasi. Perlakuan eksperimental diulang empat kali untuk setiap sampel uji menggunakan kelompok nyamuk yang berbeda. Hasilnya dirangkum dan digunakan untuk menghitung persentase angka kematian, yang digunakan untuk menentukan dosis mematikan 24 jam melalui analisis probit.
Efek antikidal sinergis EO dan permetrin dinilai menggunakan prosedur uji toksisitas lokal [42] seperti yang dijelaskan sebelumnya. Gunakan aseton atau etanol sebagai pelarut untuk menyiapkan permetrin pada konsentrasi yang diinginkan, serta campuran biner EO dan permetrin (EO-permetrin: permetrin dicampur dengan EO pada konsentrasi LD25). Kit uji (permetrin dan EO-permetrin) dievaluasi terhadap galur MCM-S dan PMD-R dari Ae. Aedes aegypti. Masing-masing dari 25 nyamuk betina diberi empat dosis permetrin untuk menguji efektivitasnya dalam membunuh nyamuk dewasa, dengan setiap perlakuan diulang empat kali. Untuk mengidentifikasi kandidat sinergis EO, 4 hingga 6 dosis EO-permetrin diberikan kepada masing-masing dari 25 nyamuk betina, dengan setiap aplikasi diulang empat kali. Perlakuan PBO-permetrin (permetrin dicampur dengan konsentrasi LD25 PBO) juga berfungsi sebagai kontrol positif. Dosis yang digunakan dalam bioassay ini dinyatakan dalam nanogram sampel uji per miligram berat tubuh betina hidup. Empat evaluasi eksperimental untuk setiap galur nyamuk dilakukan pada kelompok yang dipelihara secara individual, dan data mortalitas dikumpulkan dan dianalisis menggunakan Probit untuk menentukan dosis mematikan dalam 24 jam.
Angka kematian disesuaikan dengan menggunakan rumus Abbott [43]. Data yang disesuaikan dianalisis dengan analisis regresi Probit menggunakan program statistik komputer SPSS (versi 19.0). Nilai letal 25%, 50%, 90%, 95% dan 99% (masing-masing LD25, LD50, LD90, LD95 dan LD99) dihitung dengan menggunakan interval kepercayaan 95% yang sesuai (IK 95%). Pengukuran signifikansi dan perbedaan antara sampel uji dinilai menggunakan uji chi-square atau uji Mann-Whitney U dalam setiap uji biologis. Hasil dianggap signifikan secara statistik pada P< 0,05. Koefisien resistensi (RR) diperkirakan pada tingkat LD50 menggunakan rumus berikut [12]:
RR > 1 menunjukkan resistensi, dan RR ≤ 1 menunjukkan sensitivitas. Nilai rasio sinergi (SR) masing-masing kandidat sinergis dihitung sebagai berikut [34, 35, 44]:
Faktor ini membagi hasil ke dalam tiga kategori: nilai SR sebesar 1±0,05 dianggap tidak memiliki efek nyata, nilai SR >1,05 dianggap memiliki efek sinergis, dan nilai SR sebesar A Minyak cair berwarna kuning muda dapat diperoleh dengan distilasi uap rimpang C. rotundus dan A. galanga serta kulit kayu C. verum. Rendemen yang dihitung berdasarkan berat kering adalah 0,15%, 0,27% (b/b), dan 0,54% (v/v). b) berturut-turut (Tabel 1). Studi GC-MS terhadap komposisi kimia minyak C. rotundus, A. galanga dan C. verum menunjukkan adanya 19, 17 dan 21 senyawa, yang masing-masing mencakup 80,22, 86,75 dan 97,24% dari semua komponen (Tabel 2 ). Senyawa minyak rimpang lengkuas terutama terdiri dari siperonena (14,04%), diikuti oleh karalena (9,57%), α-kapsellan (7,97%), dan α-kapsellan (7,53%). Komponen kimia utama minyak rimpang lengkuas adalah β-bisabolena (18,27%), diikuti oleh α-bergamoten (16,28%), 1,8-sineol (10,17%) dan piperonol (10,09%). Sementara sinamaldehida (64,66%) diidentifikasi sebagai komponen utama minyak kulit kayu lengkuas, sinamat asetat (6,61%), α-kopaena (5,83%) dan 3-fenilpropionaldehida (4,09%) dianggap sebagai bahan minor. Struktur kimia siperna, β-bisabolena, dan sinamaldehida merupakan senyawa utama dari C. rotundus, A. galanga, dan C. verum, masing-masing, seperti yang ditunjukkan pada Gambar 2.
Hasil dari tiga OO yang menilai aktivitas dewasa terhadap nyamuk Aedes aegypti ditunjukkan pada Tabel 3. Semua EO ditemukan memiliki efek mematikan pada nyamuk MCM-S Aedes aegypti pada berbagai jenis dan dosis. EO yang paling efektif adalah C. verum, diikuti oleh A. galanga dan C. rotundus dengan nilai LD50 masing-masing 3,30, 7,97 dan 10,05 μg/mg MCM-S betina, sedikit lebih tinggi dari 3,22 (U=1), Z=-0,775, P=0,667), 7,94 (U=2, Z=0, P=1) dan 9,57 (U=0, Z=-1,549, P=0,333) μg/mg PMD-R pada wanita. Hal ini sesuai dengan PBO yang memiliki efek dewasa sedikit lebih tinggi terhadap PMD-R daripada strain MSM-S, dengan nilai LD50 masing-masing 4,79 dan 6,30 μg/mg betina (U = 0, Z = -2,021, P = 0,057). ). Dapat dihitung bahwa nilai LD50 C. verum, A. galanga, C. rotundus dan PBO terhadap PMD-R masing-masing sekitar 0,98, 0,99, 0,95 dan 0,76 kali lebih rendah daripada terhadap MCM-S. Dengan demikian, ini menunjukkan bahwa kerentanan terhadap PBO dan EO relatif sama antara kedua strain Aedes. Meskipun PMD-R lebih rentan daripada MCM-S, sensitivitas Aedes aegypti tidak signifikan. Sebaliknya, kedua strain Aedes sangat berbeda dalam sensitivitasnya terhadap permetrin. aegypti (Tabel 4). PMD-R menunjukkan resistensi yang signifikan terhadap permethrin (nilai LD50 = 0,44 ng/mg pada wanita) dengan nilai LD50 yang lebih tinggi yaitu 3,70 dibandingkan dengan MCM-S (nilai LD50 = 0,44 ng/mg pada wanita) ng/mg pada wanita (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029). Meskipun PMD-R jauh kurang sensitif terhadap permethrin dibandingkan MCM-S, sensitivitasnya terhadap PBO dan minyak C. verum, A. galanga, dan C. rotundus sedikit lebih tinggi daripada MCM-S.
Seperti yang diamati dalam uji biologis populasi dewasa dari kombinasi EO-permetrin, campuran biner permetrin dan EO (LD25) menunjukkan sinergi (nilai SR > 1,05) atau tidak ada efek (nilai SR = 1 ± 0,05). Efek kompleks campuran EO-permetrin pada nyamuk albino eksperimental. Galur Aedes aegypti MCM-S dan PMD-R ditunjukkan pada Tabel 4 dan Gambar 3. Penambahan minyak C. verum ditemukan sedikit mengurangi LD50 permetrin terhadap MCM-S dan sedikit meningkatkan LD50 terhadap PMD-R menjadi 0,44–0,42 ng/mg pada wanita dan dari 3,70 menjadi 3,85 ng/mg pada wanita. Sebaliknya, penambahan minyak C. rotundus dan A. galanga secara signifikan menurunkan LD50 permetrin pada MCM-S dari 0,44 menjadi 0,07 (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029) dan menjadi 0,11 (U = 0, Z) = -2,309, P = 0,029) ng/mg wanita. Berdasarkan nilai LD50 MCM-S, nilai SR campuran EO-permetrin setelah penambahan minyak C. rotundus dan A. galanga masing-masing adalah 6,28 dan 4,00. Dengan demikian, LD50 permetrin terhadap PMD-R menurun secara signifikan dari 3,70 menjadi 0,42 (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029) dan menjadi 0,003 dengan penambahan minyak C. rotundus dan A. galanga (U = 0, Z = -2,337, P = 0,029) ng/mg betina. Nilai SR permetrin yang dikombinasikan dengan C. rotundus terhadap PMD-R adalah 8,81, sedangkan nilai SR campuran lengkuas-permetrin adalah 1233,33. Relatif terhadap MCM-S, nilai LD50 dari kontrol positif PBO menurun dari 0,44 menjadi 0,26 ng/mg (betina) dan dari 3,70 ng/mg (betina) menjadi 0,65 ng/mg (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029) dan PMD-R (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029). Nilai SR campuran PBO-permetrin untuk galur MCM-S dan PMD-R masing-masing adalah 1,69 dan 5,69. Hasil ini menunjukkan bahwa minyak C. rotundus dan A. galanga serta PBO meningkatkan toksisitas permetrin pada tingkat yang lebih besar daripada minyak C. verum untuk galur MCM-S dan PMD-R.
Aktivitas dewasa (LD50) EO, PBO, permethrin (PE) dan kombinasinya terhadap strain nyamuk Aedes yang sensitif terhadap piretoid (MCM-S) dan resisten (PMD-R). Aedes aegypti
[45]. Piretroid sintetis digunakan di seluruh dunia untuk mengendalikan hampir semua artropoda yang penting dalam bidang pertanian dan medis. Namun, karena konsekuensi berbahaya dari penggunaan insektisida sintetis, terutama dalam hal perkembangan dan meluasnya resistensi nyamuk, serta dampaknya terhadap kesehatan jangka panjang dan lingkungan, kini ada kebutuhan mendesak untuk mengurangi penggunaan insektisida sintetis tradisional dan mengembangkan alternatif [35, 46, 47]. Selain melindungi lingkungan dan kesehatan manusia, keuntungan insektisida botani meliputi selektivitas tinggi, ketersediaan global, dan kemudahan produksi dan penggunaan, sehingga lebih menarik untuk pengendalian nyamuk [32,48, 49]. Penelitian ini, selain menjelaskan karakteristik kimia minyak atsiri yang efektif melalui analisis GC-MS, juga menilai potensi minyak atsiri dewasa dan kemampuannya untuk meningkatkan toksisitas permetrin sintetis. aegypti pada galur yang sensitif terhadap piretroid (MCM-S) dan galur yang resistan (PMD-R).
Karakterisasi GC-MS menunjukkan bahwa sipern (14,04%), β-bisabolene (18,27%) dan sinamaldehida (64,66%) merupakan komponen utama minyak C. rotundus, A. galanga dan C. verum, berturut-turut. Bahan kimia ini telah menunjukkan aktivitas biologis yang beragam. Ahn et al. [50] melaporkan bahwa 6-asetoksisiperena, yang diisolasi dari rimpang C. rotundus, bertindak sebagai senyawa antitumor dan dapat menginduksi apoptosis yang bergantung pada kaspase pada sel kanker ovarium. β-Bisabolene, yang diekstrak dari minyak esensial pohon mur, menunjukkan sitotoksisitas spesifik terhadap sel tumor mamae manusia dan tikus baik secara in vitro maupun in vivo [51]. Sinamaldehida, yang diperoleh dari ekstrak alami atau disintesis di laboratorium, telah dilaporkan memiliki aktivitas insektisida, antibakteri, antijamur, antiinflamasi, imunomodulator, antikanker, dan antiangiogenik [52].
Hasil bioassay aktivitas dewasa tergantung dosis menunjukkan potensi yang baik dari EO yang diuji dan menunjukkan bahwa strain nyamuk Aedes MCM-S dan PMD-R memiliki kerentanan yang sama terhadap EO dan PBO. Aedes aegypti. Perbandingan efektivitas EO dan permetrin menunjukkan bahwa yang terakhir memiliki efek alergi yang lebih kuat: nilai LD50 adalah 0,44 dan 3,70 ng/mg pada betina untuk strain MCM-S dan PMD-R, masing-masing. Temuan ini didukung oleh banyak penelitian yang menunjukkan bahwa pestisida yang terjadi secara alami, terutama produk yang berasal dari tanaman, umumnya kurang efektif dibandingkan zat sintetis [31, 34, 35, 53, 54]. Ini mungkin karena yang pertama adalah kombinasi kompleks dari bahan aktif atau tidak aktif, sedangkan yang terakhir adalah senyawa aktif tunggal yang dimurnikan. Namun, keragaman dan kompleksitas bahan aktif alami dengan mekanisme aksi yang berbeda dapat meningkatkan aktivitas biologis atau menghambat perkembangan resistensi pada populasi inang [55, 56, 57]. Banyak peneliti telah melaporkan potensi antinyamuk dari C. verum, A. galanga dan C. rotundus dan komponen-komponennya seperti β-bisabolene, cinnamaldehyde dan 1,8-cineole [22, 36, 58, 59, 60,61, 62,63 ,64]. Namun, tinjauan pustaka mengungkapkan bahwa belum ada laporan sebelumnya tentang efek sinergisnya dengan permethrin atau insektisida sintetis lainnya terhadap nyamuk Aedes. Aedes aegypti.
Dalam penelitian ini, perbedaan yang signifikan dalam kerentanan permetrin diamati antara dua strain Aedes. Aedes aegypti. MCM-S sensitif terhadap permetrin, sedangkan PMD-R jauh kurang sensitif terhadapnya, dengan tingkat resistensi 8,41. Dibandingkan dengan sensitivitas MCM-S, PMD-R kurang sensitif terhadap permetrin tetapi lebih sensitif terhadap EO, menyediakan dasar untuk penelitian lebih lanjut yang bertujuan untuk meningkatkan efektivitas permetrin dengan menggabungkannya dengan EO. Bioassay berbasis kombinasi sinergis untuk efek dewasa menunjukkan bahwa campuran biner EO dan permetrin mengurangi atau meningkatkan mortalitas Aedes. Aedes aegypti. dewasa. Penambahan minyak C. verum sedikit menurunkan LD50 permetrin terhadap MCM-S tetapi sedikit meningkatkan LD50 terhadap PMD-R dengan nilai SR masing-masing 1,05 dan 0,96. Hal ini menunjukkan bahwa minyak C. verum tidak memiliki efek sinergis atau antagonis terhadap permethrin ketika diuji pada MCM-S dan PMD-R. Sebaliknya, minyak C. rotundus dan A. galanga menunjukkan efek sinergis yang signifikan dengan secara signifikan mengurangi nilai LD50 permethrin pada MCM-S atau PMD-R. Ketika permethrin dikombinasikan dengan EO dari C. rotundus dan A. galanga, nilai SR dari campuran EO-permethrin untuk MCM-S masing-masing adalah 6,28 dan 4,00. Selain itu, ketika permethrin dievaluasi terhadap PMD-R dalam kombinasi dengan C. rotundus (SR = 8,81) atau A. galanga (SR = 1233,33), nilai SR meningkat secara signifikan. Perlu dicatat bahwa baik C. rotundus maupun A. galanga meningkatkan toksisitas permethrin terhadap PMD-R Ae. aegypti secara signifikan. Demikian pula, PBO ditemukan meningkatkan toksisitas permethrin dengan nilai SR masing-masing 1,69 dan 5,69 untuk galur MCM-S dan PMD-R. Karena C. rotundus dan A. galanga memiliki nilai SR tertinggi, mereka dianggap sebagai sinergis terbaik dalam meningkatkan toksisitas permethrin pada MCM-S dan PMD-R.
Beberapa penelitian sebelumnya telah melaporkan efek sinergis dari kombinasi insektisida sintetis dan ekstrak tanaman terhadap berbagai spesies nyamuk. Bioassay larvasida terhadap Anopheles Stephensi yang dipelajari oleh Kalayanasundaram dan Das [65] menunjukkan bahwa fenthion, organofosfat berspektrum luas, dikaitkan dengan Cleodendron inerme, Pedalium murax dan Parthenium hysterophorus. Sinergi yang signifikan diamati antara ekstrak dengan efek sinergis (SF) masing-masing sebesar 1,31, 1,38, 1,40, 1,48, 1,61 dan 2,23. Dalam skrining larvasida 15 spesies mangrove, ekstrak eter minyak bumi dari akar berkaki panjang mangrove ditemukan paling efektif terhadap Culex quinquefasciatus dengan nilai LC50 sebesar 25,7 mg/L [66]. Efek sinergis ekstrak ini dan insektisida botani piretrum juga dilaporkan mengurangi LC50 piretrum terhadap larva C. quinquefasciatus dari 0,132 mg/L menjadi 0,107 mg/L, selain itu, perhitungan SF sebesar 1,23 digunakan dalam penelitian ini. 34,35,44]. Efektivitas gabungan ekstrak akar Solanum citron dan beberapa insektisida sintetis (misalnya, fenthion, sipermetrin (piretroid sintetis) dan timethphos (larvisida organofosfor)) terhadap nyamuk Anopheles dievaluasi. Stephensi [54] dan C. quinquefasciatus [34]. Penggunaan gabungan sipermetrin dan ekstrak petroleum eter buah kuning menunjukkan efek sinergis terhadap sipermetrin dalam semua rasio. Rasio yang paling efektif adalah kombinasi biner 1:1 dengan nilai LC50 dan SF masing-masing 0,0054 ppm dan 6,83 relatif terhadap An. Stephen West[54]. Sementara campuran biner 1:1 S. xanthocarpum dan temephos bersifat antagonis (SF = 0,6406), kombinasi S. xanthocarpum-fenthion (1:1) menunjukkan aktivitas sinergis terhadap C. quinquefasciatus dengan SF 1,3125 [34]]. Tong dan Blomquist [35] mempelajari efek etilen oksida tanaman terhadap toksisitas karbaril (karbamat spektrum luas) dan permetrin terhadap nyamuk Aedes. Aedes aegypti. Hasil penelitian menunjukkan bahwa etilen oksida dari agar, lada hitam, juniper, helichrysum, cendana dan wijen meningkatkan toksisitas karbaril terhadap nyamuk Aedes. Nilai SR larva Aedes aegypti bervariasi dari 1,0 hingga 7,0. Sebaliknya, tidak ada EO yang beracun bagi nyamuk Aedes dewasa. Pada tahap ini, belum ada efek sinergis yang dilaporkan untuk kombinasi Aedes aegypti dan EO-karbaril. PBO digunakan sebagai kontrol positif untuk meningkatkan toksisitas karbaril terhadap nyamuk Aedes. Nilai SR larva dan dewasa Aedes aegypti masing-masing adalah 4,9-9,5 dan 2,3. Hanya campuran biner permetrin dan EO atau PBO yang diuji untuk aktivitas larvasida. Campuran EO-permetrin memiliki efek antagonis, sedangkan campuran PBO-permetrin memiliki efek sinergis terhadap nyamuk Aedes. Larva Aedes aegypti. Namun, percobaan respons dosis dan evaluasi SR untuk campuran PBO-permetrin belum dilakukan. Meskipun sedikit hasil telah dicapai mengenai efek sinergis dari kombinasi fitosintetik terhadap vektor nyamuk, data ini mendukung hasil yang ada, yang membuka prospek penambahan sinergis tidak hanya untuk mengurangi dosis yang diberikan, tetapi juga untuk meningkatkan efek pembunuhan. Efisiensi serangga. Selain itu, hasil penelitian ini menunjukkan untuk pertama kalinya bahwa minyak C. rotundus dan A. galanga secara sinergis memberikan kemanjuran yang jauh lebih tinggi terhadap strain nyamuk Aedes yang rentan terhadap piretoid dan resisten terhadap piretoid dibandingkan dengan PBO ketika dikombinasikan dengan toksisitas permetrin. Aedes aegypti. Namun, hasil yang tidak terduga dari analisis sinergis menunjukkan bahwa minyak C. verum memiliki aktivitas anti-dewasa terbesar terhadap kedua strain Aedes. Anehnya, efek toksik permetrin pada Aedes aegypti tidak memuaskan. Variasi dalam efek toksik dan efek sinergis mungkin sebagian disebabkan oleh paparan berbagai jenis dan tingkat komponen bioaktif dalam minyak ini.
Meskipun ada upaya untuk memahami cara meningkatkan efisiensi, mekanisme sinergisnya masih belum jelas. Kemungkinan alasan untuk perbedaan khasiat dan potensi sinergisnya mungkin mencakup perbedaan komposisi kimia produk yang diuji dan perbedaan kerentanan nyamuk yang terkait dengan status dan perkembangan resistensi. Ada perbedaan antara komponen etilen oksida mayor dan minor yang diuji dalam penelitian ini, dan beberapa senyawa ini telah terbukti memiliki efek pengusir dan racun terhadap berbagai hama dan vektor penyakit [61,62,64,67,68]. Akan tetapi, senyawa utama yang dicirikan dalam minyak C. rotundus, A. galanga, dan C. verum, seperti cypern, β-bisabolene, dan cinnamaldehyde, tidak diuji dalam makalah ini untuk aktivitas anti-dewasa dan sinergisnya terhadap Ae. Aedes aegypti. Oleh karena itu, penelitian selanjutnya diperlukan untuk mengisolasi bahan aktif yang ada dalam setiap minyak esensial dan menjelaskan khasiat insektisida dan interaksi sinergisnya terhadap vektor nyamuk ini. Secara umum, aktivitas insektisida bergantung pada aksi dan reaksi antara racun dan jaringan serangga, yang dapat disederhanakan dan dibagi menjadi tiga tahap: penetrasi ke dalam kulit tubuh serangga dan membran organ target, aktivasi (= interaksi dengan target) dan detoksifikasi zat beracun [57, 69]. Oleh karena itu, sinergisme insektisida yang menghasilkan peningkatan efektivitas kombinasi toksikan memerlukan setidaknya satu dari kategori ini, seperti peningkatan penetrasi, aktivasi yang lebih besar dari senyawa yang terakumulasi, atau detoksifikasi bahan aktif pestisida yang kurang berkurang. Misalnya, toleransi energi menunda penetrasi kutikula melalui kutikula yang menebal dan resistensi biokimia, seperti peningkatan metabolisme insektisida yang diamati pada beberapa galur serangga yang resistan [70, 71]. Efektivitas EO yang signifikan dalam meningkatkan toksisitas permetrin, terutama terhadap PMD-R, dapat menunjukkan solusi untuk masalah resistensi insektisida dengan berinteraksi dengan mekanisme resistensi [57, 69, 70, 71]. Tong dan Blomquist [35] mendukung hasil penelitian ini dengan menunjukkan interaksi sinergis antara EO dan pestisida sintetis. aegypti, ada bukti aktivitas penghambatan terhadap enzim detoksifikasi, termasuk sitokrom P450 monooksigenase dan karboksiesterase, yang terkait erat dengan perkembangan resistensi terhadap pestisida tradisional. PBO tidak hanya dikatakan sebagai penghambat metabolik sitokrom P450 monooksigenase tetapi juga meningkatkan penetrasi insektisida, seperti yang ditunjukkan oleh penggunaannya sebagai kontrol positif dalam studi sinergis [35, 72]. Menariknya, 1,8-sineol, salah satu komponen penting yang ditemukan dalam minyak lengkuas, dikenal karena efek toksiknya pada spesies serangga [22, 63, 73] dan telah dilaporkan memiliki efek sinergis di beberapa bidang penelitian aktivitas biologis [74]. . ,75,76,77]. Selain itu, 1,8-sineol dalam kombinasi dengan berbagai obat termasuk kurkumin [78], 5-fluorourasil [79], asam mefenamat [80] dan zidovudin [81] juga memiliki efek yang meningkatkan permeasi secara in vitro. Dengan demikian, kemungkinan peran 1,8-sineol dalam aksi insektisida sinergis tidak hanya sebagai bahan aktif tetapi juga sebagai peningkat penetrasi. Karena sinergisme yang lebih besar dengan permetrin, terutama terhadap PMD-R, efek sinergis minyak lengkuas dan minyak trichosanthes yang diamati dalam penelitian ini mungkin dihasilkan dari interaksi dengan mekanisme resistensi, yaitu peningkatan permeabilitas terhadap klorin. Piretroid meningkatkan aktivasi senyawa yang terakumulasi dan menghambat enzim detoksifikasi seperti sitokrom P450 monooksigenase dan karboksiesterase. Namun, aspek-aspek ini memerlukan penelitian lebih lanjut untuk menjelaskan peran spesifik EO dan senyawa terisolasinya (sendiri atau dalam kombinasi) dalam mekanisme sinergis.
Pada tahun 1977, peningkatan kadar resistensi permetrin dilaporkan pada populasi vektor utama di Thailand, dan selama beberapa dekade berikutnya, penggunaan permetrin sebagian besar digantikan oleh bahan kimia piretroid lainnya, terutama yang digantikan oleh deltametrin [82]. Namun, resistensi vektor terhadap deltametrin dan kelas insektisida lainnya sangat umum di seluruh negeri karena penggunaan yang berlebihan dan terus-menerus [14, 17, 83, 84, 85, 86]. Untuk mengatasi masalah ini, disarankan untuk merotasikan atau menggunakan kembali pestisida yang dibuang yang sebelumnya efektif dan kurang beracun bagi mamalia, seperti permetrin. Saat ini, meskipun penggunaan permetrin telah dikurangi dalam program pengendalian nyamuk pemerintah nasional baru-baru ini, resistensi permetrin masih dapat ditemukan pada populasi nyamuk. Hal ini mungkin disebabkan oleh paparan nyamuk terhadap produk pengendalian hama rumah tangga komersial, yang sebagian besar terdiri dari permetrin dan piretroid lainnya [14, 17]. Dengan demikian, penggunaan kembali permetrin yang berhasil memerlukan pengembangan dan penerapan strategi untuk mengurangi resistensi vektor. Meskipun tidak ada minyak esensial yang diuji secara individual dalam penelitian ini yang seefektif permetrin, bekerja bersama dengan permetrin menghasilkan efek sinergis yang mengesankan. Ini merupakan indikasi yang menjanjikan bahwa interaksi EO dengan mekanisme resistensi menghasilkan kombinasi permetrin dengan EO yang lebih efektif daripada insektisida atau EO saja, khususnya terhadap PMD-R Ae. Aedes aegypti. Manfaat campuran sinergis dalam meningkatkan kemanjuran, meskipun penggunaan dosis yang lebih rendah untuk pengendalian vektor, dapat mengarah pada peningkatan manajemen resistensi dan pengurangan biaya [33, 87]. Dari hasil ini, sangat menyenangkan untuk dicatat bahwa EO A. galanga dan C. rotundus secara signifikan lebih efektif daripada PBO dalam mensinergikan toksisitas permetrin pada galur MCM-S dan PMD-R dan merupakan alternatif potensial untuk bantuan ergogenik tradisional.
EO yang dipilih memiliki efek sinergis yang signifikan dalam meningkatkan toksisitas dewasa terhadap PMD-R Ae. aegypti, khususnya minyak lengkuas, memiliki nilai SR hingga 1233,33, yang menunjukkan bahwa EO memiliki potensi luas sebagai sinergis dalam meningkatkan efektivitas permetrin. Hal ini dapat merangsang penggunaan produk alami aktif baru, yang bersama-sama dapat meningkatkan penggunaan produk pengendalian nyamuk yang sangat efektif. Hal ini juga mengungkap potensi etilen oksida sebagai sinergis alternatif untuk secara efektif memperbaiki insektisida lama atau tradisional guna mengatasi masalah resistensi yang ada pada populasi nyamuk. Menggunakan tanaman yang tersedia secara umum dalam program pengendalian nyamuk tidak hanya mengurangi ketergantungan pada bahan impor dan mahal, tetapi juga merangsang upaya lokal untuk memperkuat sistem kesehatan masyarakat.
Hasil ini dengan jelas menunjukkan efek sinergis yang signifikan yang dihasilkan oleh kombinasi etilen oksida dan permetrin. Hasil ini menyoroti potensi etilen oksida sebagai sinergis tanaman dalam pengendalian nyamuk, meningkatkan efektivitas permetrin terhadap nyamuk, terutama pada populasi yang resistan. Pengembangan dan penelitian di masa mendatang akan memerlukan bioanalisis sinergis minyak lengkuas dan alpinia serta senyawa terisolasinya, kombinasi insektisida yang berasal dari alam atau sintetis terhadap berbagai spesies dan stadium nyamuk, dan pengujian toksisitas terhadap organisme nontarget. Penggunaan praktis etilen oksida sebagai sinergis alternatif yang layak.
Organisasi Kesehatan Dunia. Strategi global untuk pencegahan dan pengendalian demam berdarah 2012–2020. Jenewa: Organisasi Kesehatan Dunia, 2012.
Weaver SC, Costa F., Garcia-Blanco MA, Ko AI, Ribeiro GS, Saade G., dkk. Virus Zika: sejarah, kemunculan, biologi dan prospek pengendalian. Penelitian antivirus. 2016;130:69–80.
Organisasi Kesehatan Dunia. Lembar Fakta Demam Berdarah. 2016. http://www.searo.who.int/entity/vector_borne_tropical_diseases/data/data_factsheet/en/. Tanggal akses: 20 Januari 2017
Departemen Kesehatan Masyarakat. Status terkini kasus demam berdarah dan demam berdarah dengue di Thailand. 2016. http://www.m-society.go.th/article_attach/13996/17856.pdf. Tanggal akses: 6 Januari 2017
Ooi EE, Goh CT, Gabler DJ. 35 tahun pencegahan demam berdarah dan pengendalian vektor di Singapura. Penyakit infeksi mendadak. 2006;12:887–93.
Morrison AC, Zielinski-Gutierrez E, Scott TW, Rosenberg R. Mengidentifikasi tantangan dan mengusulkan solusi untuk mengendalikan vektor virus Aedes aegypti. PLOS Medicine. 2008;5:362–6.
Pusat Pengendalian dan Pencegahan Penyakit. Demam berdarah, entomologi dan ekologi. 2016. http://www.cdc.gov/dengue/entomologyecology/. Tanggal akses: 6 Januari 2017
Ohimain EI, Angaye TKN, Bassey SE Perbandingan aktivitas larvasida daun, kulit kayu, batang dan akar Jatropa curcas (Euphorbiaceae) terhadap vektor malaria Anopheles gambiae. SZhBR. 2014;3:29-32.
Soleimani-Ahmadi M, Watandoust H, Zareh M. Karakteristik habitat larva Anopheles di daerah malaria dalam program pemberantasan malaria di Iran tenggara. Asia Pacific J Trop Biomed. 2014;4(Suppl 1):S73–80.
Bellini R, Zeller H, Van Bortel W. Tinjauan pendekatan terhadap pengendalian vektor, pencegahan dan pengendalian wabah virus West Nile, dan tantangan yang dihadapi Eropa. Parasit vektor. 2014;7:323.
Muthusamy R., Shivakumar MS Seleksi dan mekanisme molekuler resistensi terhadap sipermetrin pada ulat merah (Amsacta albistriga Walker). Fisiologi biokimia hama. 2014;117:54–61.
Ramkumar G., Shivakumar MS Studi laboratorium tentang resistensi permetrin dan resistensi silang Culex quinquefasciatus terhadap insektisida lain. Pusat Penelitian Palastor. 2015;114:2553–60.
Matsunaka S, Hutson DH, Murphy SD. Kimia Pestisida: Kesejahteraan Manusia dan Lingkungan, Vol. 3: Mekanisme kerja, metabolisme, dan toksikologi. New York: Pergamon Press, 1983.
Chareonviriyaphap T, Bangs MJ, Souvonkert V, Kongmi M, Korbel AV, Ngoen-Klan R. Tinjauan tentang resistensi insektisida dan perilaku menghindari vektor penyakit manusia di Thailand. Parasit vektor. 2013;6:280.
Chareonviriyaphap T, Aum-Aung B, Ratanatham S. Pola terkini resistensi insektisida di antara vektor nyamuk di Thailand. Southeast Asia J Trop Med Public Health. 1999;30:184-94.
Chareonviriyaphap T, Bangs MJ, Ratanatham S. Status malaria di Thailand. Jurnal Asia Tenggara Trop Med Public Health. 2000;31:225–37.
Plernsub S, Saingamsuk J, Yanola J, Lumjuan N, Thippavankosol P, Walton S, Somboon P. Frekuensi temporal mutasi resistensi knockdown F1534C dan V1016G pada nyamuk Aedes aegypti di Chiang Mai, Thailand, dan dampak mutasi pada efisiensi semprotan kabut termal yang mengandung piretroid. Aktatrop. 2016;162:125–32.
Vontas J, Kioulos E, Pavlidi N, Moru E, Della Torre A, Ranson H. Resistensi insektisida pada vektor utama demam berdarah Aedes albopictus dan Aedes aegypti. Fisiologi biokimia hama. 2012;104:126–31.
Waktu posting: 08-Jul-2024